Kľúčový rozdiel medzi gélovou a papierovou elektroforézou je v tom, že separačným médiom pri gélovej elektroforéze je agarózový gél, kým separačným médiom pri papierovej elektroforéze je papierový pásik ponorený do tlmivého roztoku.
Elektroforéza je analytická technika, ktorá je užitočná na analýzu vzorky pomocou elektrických vlastností chemických látok prítomných v danej vzorke. Tu môžeme pozorovať pohyb dispergovanej rozpustenej látky v analyzovanom médiu. Preto môžeme určiť pohyb chemického druhu vzhľadom na médium. Gélová elektroforéza a papierová elektroforéza sú dve dôležité techniky v chémii.
Čo je gélová elektroforéza?
Gélová elektroforéza môže byť opísaná ako metóda separácie a analýzy makromolekúl v závislosti od veľkosti a náboja. Makromolekuly v tomto kontexte môžu označovať DNA, RNA, proteíny a ich fragmenty. Táto metóda je užitočná v klinickej chémii na separáciu proteínov podľa náboja alebo veľkosti. Okrem toho je v biochémii a molekulárnej biológii dôležité pre separáciu zmiešanej populácie fragmentov DNA a RNA podľa ich dĺžky odhadnúť veľkosť fragmentov DNA a RNA. Okrem toho ho môžeme použiť na oddelenie bielkovín podľa ich náboja.
Obrázok 01: Prístrojové vybavenie na gélovú elektroforézu
Môžeme oddeliť molekuly nukleových kyselín aplikáciou elektrického poľa na pohyb záporne nabitých molekúl cez matricu agarózy alebo iných látok. V tomto procese sa kratšie molekuly môžu pohybovať rýchlejšie, zatiaľ čo dlhšie molekuly sa pohybujú pomalšie. Je to preto, že kratšie molekuly sa môžu ľahko pohybovať cez gélové póry. Tento pohyb fragmentov cez póry nazývame „sitím“. Okrem toho z tejto metódy zvyčajne nemôžeme oddeliť proteíny podľa ich veľkosti, pretože proteíny sú príliš veľké na to, aby sa dali preosiať z pórov gélu. Tento proces však môžeme použiť na separáciu nanočastíc.
Čo je papierová elektroforéza?
Papierovú elektroforézu možno opísať ako separáciu s použitím filtračných papierov namočených v tlmivom roztoku. Vo všeobecnosti používame ako tlmivý roztok kyselinu dietylbarbiturovú a kyselinu barbiturovú rozpustenú v zásadách. Hodnota pH tohto tlmivého roztoku je pH 8,6. Okrem toho môžeme na papier umiestniť malé množstvo séra, ktorým potom niekoľko hodín prechádza jednosmerný prúd.
Papierová elektroforéza je dôležitá na separáciu malých, nabitých molekúl, vrátane aminokyselín a malých bielkovín. Tu musíme navlhčiť prúžok filtračného papiera tlmivým roztokom a konce prúžku ponoriť do tlmivých zásobníkov, ktoré obsahujú elektródy. Prvým človekom, ktorý použil túto metódu, bol Konig v roku 1937. Vo svojich zisteniach zaviedol tlmivý roztok nasiaknutý papierom na zónovú elektroforézu a tiež navrhol UV detekciu.
Aký je rozdiel medzi gélovou a papierovou elektroforézou?
Elektroforéza je analytická technika, ktorá je užitočná na analýzu vzorky pomocou elektrických vlastností chemických látok prítomných v danej vzorke. Gélová elektroforéza a papierová elektroforéza sú dve dôležité metódy elektroforézy. Kľúčový rozdiel medzi gélovou a papierovou elektroforézou je v tom, že separačným médiom pri gélovej elektroforéze je agarózový gél, zatiaľ čo separačným médiom pri papierovej elektroforéze je papierový pásik ponorený do tlmivého roztoku.
Nižšie je zhrnutie rozdielu medzi gélovou a papierovou elektroforézou v tabuľkovej forme na porovnanie vedľa seba.
Zhrnutie – Gélová vs papierová elektroforéza
Gélová elektroforéza je metóda separácie a analýzy makromolekúl v závislosti od veľkosti a náboja, zatiaľ čo papierová elektroforéza je separácia pomocou filtračného papiera namočeného v tlmivom roztoku. Kľúčový rozdiel medzi gélovou a papierovou elektroforézou je v tom, že separačným médiom pri gélovej elektroforéze je agarózový gél, zatiaľ čo separačným médiom pri papierovej elektroforéze je papierový pásik ponorený do tlmivého roztoku.
