Kľúčový rozdiel – monolayer vs. Suspension Culture
Tkanivová kultúra je metodológia, ktorá sa používa na vyvolanie rastu buniek, ktoré sú oddelené od organizmu a pestujú sa v rôznych kultivačných médiách. V tkanivovej kultúre zohrávajú dôležitú úlohu kultivačné médiá. Rôzne bunky rastú v rôznych kultivačných médiách v závislosti od fyziologických a chemických vlastností buniek. Monovrstvová kultúra a suspenzná kultúra sú dva hlavné typy kultúr, ktoré sa používajú počas procesu tkanivovej kultúry. Jednovrstvová kultúra je kultúra závislá od ukotvenia, kde bunka rastie, kým je pripojená k substrátu, a suspenzná kultúra je kultúra nezávislá od ukotvenia, kde sa na vytvorenie bunkových kultúr v kvapalnom médiu používajú bunkové agregáty. Toto je kľúčový rozdiel medzi jednovrstvovou kultúrou a suspenznou kultúrou.
Čo je jednovrstvová kultúra?
Monovrstvová kultúra je definovaná ako typ kultúry, v ktorej sa bunky kultivujú v jednej vrstve na banke alebo Petriho miske obsahujúcej kultivačné médium. Jednovrstvová kultúra sa tiež označuje ako adherentná kultúra alebo kultúra závislá od ukotvenia. Dôvodom odkazovania na adherentnú alebo na ukotvení závislú kultúru je to, že tieto bunky potrebujú substrát na pripojenie počas svojho rastu. Priľnú k bunkovej kultúre obsahujúcej substrát.
Podklady, ktoré sa používajú v kultivačnom médiu, by sa mali pred použitím nabiť. Tieto nabité substráty podporujú interakcie medzi bunkami. Na nabíjanie týchto substrátov sa používajú elektrické iónové výbojky, povlaky dvojmocných katiónov a gama žiarenie. V jednovrstvovom kultivačnom médiu, akonáhle sú bunky naočkované, je rast regulovaný použitím procesu nazývaného kontaktná inhibícia. Počas kontaktnej inhibície sa rast buniek zastaví, aby sa zastavilo množenie normálnych buniek, keď vytvorili monovrstvu pripojenú k povrchu.
Obrázok 01: Adherent Culture
Bunky, ktorých pripojenie závisí od iných substrátov, sa označujú ako adherentné bunky. Tieto adherentné bunky sú často odvodené z orgánových tkanív, ako sú obličky atď. Tieto bunky sú nepohyblivé a typicky sú pripojené k spojivovému tkanivu. Preto by pri pestovaní týchto buniek na kultivačnom médiu mali byť poskytnuté všetky tieto základné rastové faktory. Dôležitosť jednovrstvovej kultúry spočíva v tom, že napodobňuje pôvodné prirodzené podmienky, aby sa bunka správne usadila.
Čo je kultúra pozastavenia?
Suspenznú kultúru možno definovať ako typ kultúry, kde sa množenie malého agregátu buniek alebo jednotlivých buniek uskutočňuje suspendované v tekutom médiu, ktoré sa neustále mieša. Inými slovami, suspenzná kultúra je tiež známa ako bunková kultúra bunkovej suspenznej kultúry. Táto kultúra pomáha pri vytváraní jednotlivých bunkových kultúr, ktoré by sa mohli použiť počas skúmania rastlinných buniek s ohľadom na ich rôzne potenciály a vlastnosti. Skúmanie tohto aspektu by sa mohlo použiť na pochopenie vzájomných vzťahov medzi bunkami a ich vplyvmi, pokiaľ ide o mnohobunkové organizmy.
Počas počiatočného vývoja rastliny sa vytvorí kalus, ktorý je zhlukom nediferencovaných buniek. Táto úroveň rastu spôsobuje prekážky pri identifikácii bunkových udalostí počas fázy rastu a vývoja rastliny. Suspenzná kultúra bola zavedená na prekonanie tejto situácie, pretože poskytla vynikajúce kultivačné médium na vytvorenie jednotlivých bunkových kultúr z malých bunkových agregátov získaných z kalusu. Toto sa využilo na štúdium rôznych morfologických a biochemických aspektov počas počiatočných štádií vývoja rastliny.
Obrázok 02: Suspension Culture
V kontexte získania ideálnej bunkovej kultúry je typickou metódou prenesenie drobivej hmoty kalusu do miešaného tekutého média, kde sa hmota ľahko rozbije a rozptýli. Potom sa veľké kalusy oddelia, aby sa zachovali malé bunkové agregáty a jednotlivé bunky. Potom sa tieto bunky prenesú do iného média. Aktívne rastúce bunky sa získajú po dvoch až troch týždňoch.
Aké sú podobnosti medzi jednovrstvovou a suspenznou kultúrou?
- Monovrstvové aj suspenzné kultúry sú dva typy bunkových kultúr, ktoré sa používajú na vytvorenie bunky
- Tak jednovrstvové, ako aj suspenzné typy kultúr sa pestujú na vhodných kultivačných médiách.
- V tkanivových kultúrach sa bežne používajú jednovrstvové aj suspenzné kultúry.
Aký je rozdiel medzi jednovrstvovou a suspenznou kultúrou?
Monolayer vs Suspension Culture |
|
| Jednovrstvová kultúra je kultúra závislá od ukotvenia, kde bunky rastú, kým sú pripojené k substrátu. | Suspenzná kultúra je kultúra nezávislá na ukotvení, kde sa množenie malých agregátov buniek alebo jednotlivých buniek uskutočňuje suspendované v tekutom médiu, ktoré sa mieša. |
| Požiadavky | |
| Monovrstvová kultivácia vyžaduje nádobu ošetrenú tkanivovou kultúrou s pravidelným pasážovaním. | Suspenznú kultiváciu možno dosiahnuť nádobami, ktoré nie sú ošetrené tkanivovou kultúrou. |
| Obmedzenia rastu | |
| Rast jednovrstvovej kultúry bude obmedzený povrchom, ktorý priamo ovplyvňuje výnos. | Obmedzenie rastu suspenznej kultúry prebieha koncentráciou buniek v médiu. |
| Bunková disociácia | |
| Disociácia buniek prebieha mechanicky alebo enzymaticky v jednovrstvovej kultúre. | Suspenzná kultúra nevyžaduje asistenciu enzýmov a mechanických prostriedkov na bunkovú disociáciu. |
| Vizualizácia buniek | |
| Monovrstvová kultúra umožňuje jednoduchú vizualizáciu buniek. | Je ťažšie zobraziť bunky v suspenzných kultúrach. |
| Function | |
| Monovrstvová kultúra sa používa v oblasti cytológie, výskumu a nepretržitého zberu produktov. | Suspenzná kultúra sa používa na hromadnú produkciu bielkovín, výskumné štúdie a dávkový zber. |
Summary – Monolayer vs Suspension Culture
Monovrstvová kultúra a suspenzná kultúra sú dve hlavné kultúry používané v tkanivových kultúrach. Jednovrstvová kultúra je kultúra závislá od ukotvenia. Bunky rastú v tejto kultúre, kde sú pripojené k substrátu prítomnému v kultúre. Substráty sa pred použitím nabijú za účasti rôznych zdrojov, ako sú dvojmocné povlaky a iónový výboj. Suspenzné kultúry sú kultúry nezávislé na ukotvení, kde bunky rastú bez pomoci substrátu na pripojenie. Táto kultúra pomáha pri vytváraní jednotlivých bunkových kultúr, ktoré by sa mohli použiť počas skúmania rastlinných buniek s ohľadom na ich rôzne potenciály a vlastnosti. Toto je rozdiel medzi monovrstvovou kultúrou a suspenznou kultúrou.
