Kľúčový rozdiel – UV verzus viditeľný spektrofotometer
Nie je žiadny rozdiel medzi UV a viditeľným spektrofotometrom, pretože oba tieto názvy sa používajú pre rovnaký analytický prístroj.
Tento prístroj je bežne známy ako UV-viditeľný spektrofotometer alebo ultrafialový-viditeľný spektrofotometer. Tento prístroj využíva techniku absorpčnej spektroskopie v ultrafialovej a viditeľnej spektrálnej oblasti.
Čo je UV spektrofotometer (alebo viditeľný spektrofotometer)?
UV spektrofotometer, tiež známy ako viditeľný spektrofotometer, je analytický prístroj, ktorý analyzuje kvapalné vzorky meraním ich schopnosti absorbovať žiarenie v ultrafialových a viditeľných spektrálnych oblastiach. To znamená, že táto absorpčná spektroskopická technika využíva svetelné vlny vo viditeľných a priľahlých oblastiach elektromagnetického spektra. Absorpčná spektroskopia sa zaoberá excitáciou elektrónov (pohyb elektrónu zo základného do excitovaného stavu), keď atómy vo vzorke absorbujú svetelnú energiu.
Obrázok 01: UV-viditeľný spektrofotometer
Elektrónové excitácie prebiehajú v molekulách obsahujúcich pí elektróny alebo neväzbové elektróny. Ak môžu byť elektróny molekúl vo vzorke ľahko excitované, vzorka môže absorbovať dlhšie vlnové dĺžky. Výsledkom je, že elektróny v pí väzbách alebo neväzbových orbitáloch môžu absorbovať energiu zo svetelných vĺn v UV alebo viditeľnom rozsahu.
Hlavné výhody UV-Visible spektrofotometra zahŕňajú jednoduchú obsluhu, vysokú reprodukovateľnosť, nákladovo efektívnu analýzu atď. Okrem toho môže na meranie analytov využívať široký rozsah vlnových dĺžok.
Beer-Lambertov zákon
Beer-Lambertov zákon udáva absorpciu určitej vlnovej dĺžky vzorkou. Uvádza, že absorpcia vlnových dĺžok vzorkou je priamo úmerná koncentrácii analytu vo vzorke a dĺžke dráhy (vzdialenosti, ktorú prejde svetelná vlna cez vzorku).
A=εbC
Kde A je absorbancia, ε je koeficient absorpcie, b je dĺžka dráhy a C je koncentrácia analytu. Existuje však niekoľko praktických úvah týkajúcich sa analýzy. Koeficient absorpcie závisí len od chemického zloženia analytu. Spektrofotometer by mal mať monochromatický zdroj svetla.
Základné časti UV-viditeľného spektrofotometra
- Zdroj svetla
- Držiak vzorky
- Dfrakčné mriežky v monochromátore (na oddelenie rôznych vlnových dĺžok)
- Detektor
UV-viditeľný spektrofotometer môže používať jednoduchý alebo dvojitý lúč. V jednolúčových spektrofotometroch všetko svetlo prechádza cez vzorku. Ale v dvojlúčovom spektrofotometri sa svetelný lúč rozdelí na dve frakcie a jeden lúč prechádza cez vzorku, zatiaľ čo druhý lúč sa stáva referenčným lúčom. Je to pokročilejšie ako používanie jediného svetelného lúča.
Použitie UV-viditeľného spektrofotometra
Uv-viditeľný spektrofotometer možno použiť na kvantifikáciu rozpustených látok v roztoku. Na kvantifikáciu analytov, ako sú prechodné kovy a konjugované organické zlúčeniny (molekuly obsahujúce striedajúce sa väzby pi), je možné použiť tento nástroj. Tento nástroj môžeme použiť na štúdium riešení, ale niekedy vedci používajú túto techniku aj na analýzu pevných látok a plynov.
Zhrnutie – UV verzus viditeľný spektrofotometer
UV-viditeľný spektrofotometer je prístroj, ktorý využíva techniky absorpčnej spektroskopie na kvantifikáciu analytov vo vzorke. Nie je žiadny rozdiel medzi UV a viditeľným spektrofotometrom, pretože oba názvy označujú rovnaký analytický prístroj.