Kľúčový rozdiel medzi doskou na nalievanie a doskou na roztieranie spočíva v tom, že známy objem vzorky sa rozprestrie na povrch agarového média v nanášacej platni, zatiaľ čo na platni na naliatie sa známy objem vzorky zmieša s agar a potom naliať na tanier. Pri porovnaní presnosti týchto dvoch techník má tanier na nalievanie vyššiu presnosť ako tanier na roztieranie.
Štandardná metóda počítania na platniach je prístup založený na raste, ktorý počíta počet živých (rastúcich/kultivovateľných/životaschopných) mikroorganizmov vo vzorke. Je to účinná metóda používaná v mnohých mikrobiologických oblastiach na analýzu počtu živých mikroorganizmov. Túto techniku využívajú oblasti ako potravinárstvo a mliečne výrobky, zdravotníctvo, životné prostredie, vodné a poľnohospodárske oblasti, mikrobiálna genetika, molekulárna mikrobiológia, vývoj rastových médií a biotechnológia (technológia bioreaktorov, fermentácia, čistenie odpadových vôd atď.). Okrem toho existujú dva hlavné spôsoby vykonania štandardného počítania tanierov: sú to technika rozprestretej dosky a technika naliatej dosky.
Čo je nalievací tanier?
Technika nalievacej platne je mikrobiálna metóda na výpočet niektorých životaschopných buniek prítomných vo vzorke. Špecialitou metódy nalievacej platne je, že známy objem vzorky sa najprv zmieša s agarom a potom sa naleje na platňu.
Obrázok 01: Pour tanier
Ďalšie kroky sú podobné technike rozprestretého taniera, o ktorej sa hovorí v ďalšej časti. Ďalším krokom po naliatí agaru zmiešaného so vzorkou je nechať ho stuhnúť a inkubovať. Po inkubácii je nevyhnutné spočítať počet životaschopných kolónií na výpočet konečného CFU pre 1 g alebo 1 ml.
Čo je to roztierací tanier?
Spread plate je technika na výpočet životaschopných buniek vo vzorke. Pri tejto technike je potrebné sériové riedenie vzorky, aby sa zabezpečilo, že aspoň z jednej vznikne spočítateľný počet kolónií. Tu sa postupuje tak, že sa na povrch agarovej platne napipetuje stanovený objem riedenia a rýchlo a rovnomerne sa rozotrie po povrchu agaru pomocou sklenenej nátierky, ktorá bola zapálená alkoholom a ochladená. Na získanie spoľahlivej strednej hodnoty je potrebné vykonať replikácie. Ďalším krokom je sušenie týchto platní na krátku dobu, potom ich prevráťte a umiestnite do inkubátora pri teplote vhodnej na rast a na stanovenú inkubačnú dobu.
Obrázok 02: Roztierací tanier
Po inkubácii sa pri skúmaní platní ukáže rast. Pri jednom alebo viacerých riedeniach počet buniek prítomných v inokulantoch (napr. 100 alebo 200 μl) povedie k vzniku 30 až 300 samostatných kolónií na povrchu agaru. Počty menej ako 30 kolónií sú štatisticky nespoľahlivé. Počty nad 300 sa ťažko vyčíslujú a sú náchylné na chyby.
Aké sú podobnosti medzi tanierom na nalievanie a tanierom na roztieranie?
- Roztieracia doska a poliaca doska sú dve techniky na získanie počtu životaschopných buniek prítomných vo vzorke.
- Obaja sú priame metódy.
- Vzorkové chyby sa môžu vyskytnúť pri oboch metódach.
- Obmedzenia podmienok rastu ovplyvňujú výsledok oboch metód.
- Konečný výsledok oboch metód môžu ovplyvniť aj technické chyby.
- Hoci sú tieto dve metódy životaschopné, nepoužívajú sa na pestovanie nekultivovateľných baktérií.
Aký je rozdiel medzi tanierom na nalievanie a tanierom na roztieranie?
Pour plate je mikrobiálna technika na stanovenie počtu životaschopných buniek vo vzorke. Technika rozprestretej platne je ďalšou technikou na výpočet baktérií pestovaných na povrchu média. Pri technike nalievacej platne je procesom pridanie vzorky na povrch stuhnutého média na odlievacej platni. Pri technike spred platne je však procesom zmiešať vzorku s roztaveným agarom a potom ho naliať na platňu.
S ohľadom na presnosť týchto dvoch techník má liaci tanier vyššiu presnosť ako sypaný tanier. Okrem toho, na rozdiel od nanášacej dosky, sa na rovnomerné roztieranie vzorky na povrchu na roztieracej doske používa sklenená stierka. Ďalej je možné pomocou vylievacej platne vyčísliť aeróby, anaeróby a fakultatívne anaeróby. Avšak s použitím roztieracej dosky je možné len spočítať aeróby. Okrem toho, stuhnuté agarové platne sú potrebné na nanášanie platne, zatiaľ čo tekuté roztavené agarové médium je nevyhnutné pre metódu nalievania.
Zhrnutie – Pour tanier verzus rozprestretý tanier
Pour plate a Spread plate sú dve techniky v mikrobiológii na uľahčenie počítania mikrobiálnych buniek vo vzorke. Obidve metódy sú založené na raste, preto merajte životaschopné bunky. Počas nalievacej platne sa známy objem vzorky zmieša s roztaveným agarom a naleje sa na platňu. Počas roztieracej platne sa známy objem nanesie na povrch stuhnutého agarového média. Toto je rozdiel medzi tanierom na nalievanie a tanierom na roztieranie.
