Kľúčový rozdiel medzi kinetickou reakciou a reakciou v koncovom bode je v tom, že pri metóde kinetickej reakcie meriame rozdiel v absorbancii medzi dvoma bodmi počas priebehu reakcie, zatiaľ čo pri metóde koncovej reakcie meriame celkové množstvo analyty, ktoré sa zúčastňujú reakcie.
Metóda kinetickej reakcie a metóda koncovej reakcie sú užitočné pri analýze enzýmov. Tieto metódy využívame najmä v klinickej chémii. Okrem týchto dvoch metód existuje aj iná metóda; metóda pevného času.
Čo je kinetická reakcia?
Metóda kinetickej reakcie je analytická metóda používaná v klinickej chémii na určenie rozdielu v absorbancii medzi dvoma bodmi priebehu reakcie. Tu na toto určenie používame určené časové obdobie. Mali by sme predpokladať toto rozhodnutie; počas sledovaného časového intervalu sa tvorí konštantné množstvo produktu. Zvyčajne uvažujeme krátky časový úsek (20 sekúnd až 1 minúta). To znamená, aby sa predišlo akémukoľvek účinku spôsobenému degradáciou enzýmov počas postupu reakcie.
Pred spustením reakcie by sme mali vykonať predinkubáciu, aby sme sa vyhli akýmkoľvek interferenciám pochádzajúcim z iných látok ako je analyt. Počas predinkubácie tieto látky úplne reagujú s reagenčným systémom. Existujú dva hlavné typy ako;
- Narastajúci typ: reakcia prebieha pozitívne Tu je počiatočná absorbancia vždy nižšia ako konečná absorbancia.
- Znižujúci typ: reakcia prebieha negatívne. Počiatočná absorbancia je vyššia hodnota ako konečná absorbancia.
Čo je to reakcia koncového bodu?
Reakčná metóda koncového bodu je analytická metóda užitočná v klinickej chémii na určenie celkového množstva analytov spotrebovaných počas priebehu reakcie. pri tejto metóde berieme do úvahy skôr koncový bod reakcie než dva špecifické body ako pri kinetickej metóde. Koncový bod zvyčajne prichádza do 5 až 15 minút pri 37 ◦C.
Obrázok 01: Na meranie absorbancie môžeme použiť spektrofotometre
Reakcia môže na konci poskytnúť buď farebný produkt, alebo bezfarebný produkt. Môžeme však merať absorbanciu tohto produktu pomocou spektrofotometra. Absorbancia vzorky sa časom zvyšuje. Dosahuje stabilnú hodnotu, ktorá sa časom nebude meniť. Toto je konečný bod reakcie.
Aký je rozdiel medzi kinetickou a koncovou reakciou?
Metóda kinetickej reakcie je analytická metóda používaná v klinickej chémii na určenie rozdielu v absorbancii medzi dvoma bodmi priebehu reakcie. Tu meriame rozdiel v absorbancii medzi dvoma bodmi počas priebehu reakcie. Navyše čas potrebný na túto reakciu je približne 20 sekúnd až 1 minúta. Zatiaľ čo metóda koncového bodu reakcie je analytická metóda používaná v klinickej chémii na stanovenie celkového množstva analytov spotrebovaných počas postupu reakcie. Pri tejto metóde meriame celkové množstvo analytov, ktoré sa zúčastňujú reakcie. Okrem toho, čas potrebný na túto reakciu je 5 až 15 minút.
Súhrn – kinetická vs. reakcia koncového bodu
Existujú tri hlavné reakčné metódy, ktoré používame v klinickej chémii na analýzu enzymatických reakcií; kinetická metóda, metóda fixného času a metóda koncového bodu. Rozdiel medzi kinetickou a koncovou reakciou je v tom, že pri metóde kinetickej reakcie meriame rozdiel v absorbancii medzi dvoma bodmi počas priebehu reakcie, zatiaľ čo pri metóde koncovej reakcie meriame celkové množstvo analytov, ktoré sa zúčastňujú reakcie.
