Kľúčový rozdiel medzi chromozómovým pruhovaním a chromozómovým maľovaním je v tom, že chromozómové pruhovanie je technika farbenia, ktorá zobrazuje oblasti chromozómov v rozlíšiteľných tmavých a svetlých pruhoch, ale maľovanie chromozómov je hybridizačná technika, v ktorej sú špecifické oblasti alebo segmenty chromozómov maľované fluorescenčne značenými sondami špecifickými pre sekvenciu.
V cytogenetike je potrebné vytvoriť viditeľný karyotyp organizmu, aby bolo možné identifikovať chromozómy a ich aberácie. Páskovanie chromozómov a maľovanie chromozómov sú dve cytogenetické techniky, ktoré pomáhajú pri vizualizácii chromozómov. Obe techniky sú užitočné pri identifikácii genetických porúch.
Čo je to chromozómové páskovanie?
Chromozómové pruhy je technika farbenia, ktorá zobrazuje striedanie svetlých a tmavých pruhov alebo oblastí pozdĺž dĺžky chromozómu. Pás sa vzťahuje na časť chromozómu, ktorá je jasne odlíšiteľná od susedných segmentov tým, že vyzerá tmavšie alebo svetlejšie. Aby sa vytvorili tmavé a svetlé pásy, je potrebné zafarbiť chromozómy pomocou vhodného farbiva, ako je fluorescenčné farbivo quinacrine alebo Giemsa farbivo.
Existuje niekoľko typov techník chromozomálneho pruhovania. Medzi nimi Q-banding, Reverse (R) banding a G-banding sú zovšeobecnené techniky páskovania. Technika G páskovania využíva farbenie nazývané Giemsovo farbenie a farbí oblasti bohaté na AT heterochromatických oblastí v tmavo zafarbených pásoch a euchromatické oblasti bohaté na GC v slabo zafarbených pásoch. R pruhovanie je opakom G pruhovania a farbí oblasti bohaté na GC v tmavých pruhoch a oblasti bohaté na AT vo svetlých pruhoch. Q pruhovanie na druhej strane využíva fluorescenčné farbivo chinakrín a farbí chromozómy žltou fluorescenciou rôznej intenzity. Technika páskovania C je ďalšou technikou páskovania, ktorá farbí oblasti centroméry. Technika T banding navyše vizualizuje oblasti telomér.
Obrázok 01: Chromozómové pruhy
Vzor prúžkov je pre organizmy jedinečný. Preto sú tieto jedinečné vzory pásov dôležité pri identifikácii chromozómov a zisťovaní chromozomálnych aberácií (zlomenie chromozómov, strata, duplikácia, translokácia alebo invertované segmenty).
Čo je maľovanie chromozómov?
Maľovanie chromozómov je technika, pri ktorej sa špecifické oblasti alebo segmenty chromozómov natierajú sekvenčne špecifickými sondami, ktoré sú fluorescenčne označené. Preto je chromozomálna maľba vždy spojená s in situ technikou FISH. Je úplne založený na molekulárnej hybridizácii so sekvenčne špecifickými sondami na chromozómoch. Preto potrebuje špecifické sondy na hybridizáciu cieľových chromozómov alebo chromozómových oblastí.
Obrázok 02: Chromozomálna maľba
Navyše táto technika spočiatku vyžaduje denaturáciu cieľovej chromozomálnej DNA, ktorá je v metafáze. Po druhé, krok hybridizácie sa uskutočňuje so sondami. Keď sondy nájdu svoje komplementárne sekvencie, hybridizujú so špecifickými oblasťami chromozómu. Hybridizované miesta môžeme ľahko pozorovať pomocou autorádiografie alebo imunofluorescencie. Príprava sond, denaturácia, hybridizácia a vizualizácia sú štyri hlavné kroky zahrnuté v chromozomálnom maľovaní.
Pokiaľ ide o aplikácie, chromozomálne maľovanie je užitočné pri identifikácii chromozomálnych preskupení, bodov zlomu a pri určovaní extrachromozomálnych materiálov. Navyše je to výkonný nástroj na presnú lokalizáciu rôznych génových sekvencií chromozómov na mikroskopickej úrovni. Okrem toho je chromozomálne maľovanie užitočné pri identifikácii génov pre požadované znaky v chromozómoch.
Aké sú podobnosti medzi chromozómovým pruhovaním a chromozómovým maľovaním?
- Pri cytogenetickej analýze sa používajú dve techniky používané pri vytváraní pásov chromozómov a maľovanie chromozómov.
- Obe techniky vizualizujú chromozómy zvyčajne v metafáze.
- Tieto techniky dokážu identifikovať normálne chromozómy a aberácie.
- Tieto techniky sú navyše skutočne užitočné pri identifikácii genetických porúch.
Aký je rozdiel medzi chromozómovým pruhovaním a chromozómovým maľovaním?
Chromozómový pásik je technika farbenia, ktorá zobrazuje časti chromozómov v tmavých a svetlých pásoch, ktoré sú rozlíšiteľné. Medzitým je maľovanie chromozómov hybridizačnou technikou, ktorá maľuje špecifické oblasti chromozómov sekvenčne špecifickými sondami, ktoré sú fluorescenčne označené. Toto je kľúčový rozdiel medzi chromozómovým pruhovaním a chromozómovým maľovaním. Okrem toho, chromozómové pruhy vytvárajú striedajúce sa tmavé a svetlé pruhy pozdĺž dĺžky chromozómu, zatiaľ čo chromozómové maľovanie vytvára fluorescenčne označené oblasti chromozómov.
Okrem toho, pruhovanie chromozómov závisí od schopnosti chromozomálnej DNA zafarbiť sa farbivom, zatiaľ čo farbenie chromozómov závisí od molekulárnej hybridizácie so sekvenčne špecifickými sondami na chromozómoch. Toto je dôležitý rozdiel medzi chromozómovým pruhovaním a chromozómovým maľovaním. Okrem toho, na rozdiel od páskovania chromozómov, technika maľovania chromozómov vyžaduje sekvenčne špecifické fluorescenčne značené sondy.
Zhrnutie – Chromozómové pruhovanie verzus chromozómové maľovanie
Chromozómové pruhy a maľovanie chromozómov sú dve techniky používané na vizualizáciu chromozómov, zvyčajne v metafáze. Obe techniky pomáhajú identifikovať numerické a štrukturálne chromozomálne aberácie a genetické choroby. Páskovanie chromozómov je technika farbenia, ktorá zobrazuje špecifické oblasti chromozómov v tmavých a svetlých pásoch, ktoré sú rozlíšiteľné. Medzitým je chromozomálne maľovanie typom hybridizačnej techniky, ktorá vizualizuje špecifické oblasti chromozómov v dôsledku hybridizácie s fluorescenčne značenými sekvenčne špecifickými sondami. Toto je kľúčový rozdiel medzi chromozómovým pruhovaním a chromozómovým maľovaním.
