Kľúčový rozdiel medzi Elisou a Western blotom je v tom, že Elisa alebo enzýmová imunoanalýza je diagnostický nástroj, ktorý zisťuje, či bol pacient vystavený konkrétnemu typu vírusu alebo inému infekčnému agens, zatiaľ čo Western blot je technika, ktorá deteguje špecifický proteín zo vzorky proteínu.
AIDS sa stal globálnym problémom a výskyt tohto smrteľného ochorenia sa v posledných desaťročiach alarmujúco zvýšil. Testy HIV zisťujú prítomnosť vírusu ľudskej imunodeficiencie (HIV), ktorý spôsobuje tento syndróm. Spomedzi rôznych testov na HIV sú dnes veľmi populárne testy ELISA a Western Blot. ELISA je skratka pre enzýmový imunosorbentový test, čo je doštičková testovacia technika. Ide o enzýmový imunotest používaný na detekciu protilátok proti HIV. Western blot deteguje špecifický proteín z proteínovej zmesi pomocou značenej protilátky.
Kľúčový rozdiel
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je Elisa
3. Čo je to Western Blot
4. Podobnosti medzi Elisou a Western Blot
5. Porovnanie vedľa seba – Elisa vs Western Blot v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
Čo je Elisa?
ELISA, čo je skratka pre enzyme-linked immunosorbent assay, bol prvý test určený predovšetkým na detekciu HIV. Ide o doštičkový test. Používa sa na detekciu protilátok proti HIV a tento test vykazuje vysokú citlivosť. Pri tejto technike sa antigény vo vzorke viažu s imobilizovanými protilátkami na pevnom povrchu. Po imobilizácii tvoria antigény komplexy s protilátkami spojenými s enzýmami. Potom sa tieto konjugované enzýmy inkubujú s príslušným substrátom.
Obrázok 01: ELISA
Reakcia enzýmu a substrátu vytvára merateľný farebný produkt. Meraním množstva produktu je možné kvantifikovať počet antigénov prítomných vo vzorke. Preto je ELISA veľmi špecifická a sofistikovaná technika, ktorá si vyžaduje pozornosť skúsených technikov. Je to tiež časovo náročný proces s požiadavkou pokročilého vybavenia.
Čo je Western Blot?
Western blotting je technika, ktorá umožňuje detekciu špecifického proteínu z proteínovej zmesi. Western blot je membrána používaná počas blotovacieho postupu na získanie zrkadlového obrazu proteínových vzorov v SDS-polyakrylamidovom géli. Membrána používaná na Western blotting je väčšinou tvorená nitrocelulózou alebo polyvinylidéndifluoridom (PVDF). Membrána s preneseným proteínom sa môže použiť na identifikáciu konkrétneho proteínu. Na detekciu požadovaného proteínu hybridizáciou je potrebná kvalitná protilátka. Protilátka sa naviaže na svoj špecifický antigén a odhalí prítomnosť požadovaného antigénu, ktorým je proteín.
Obrázok 02: Western Blot
Prenos proteínov z SDS polyakrylamidového gélu na Western blot sa vykonáva elektroblotovaním. Je to efektívna a rýchla metóda, ktorá spôsobí, že proteíny elektroforézou z gélu prejdú na nitrocelulózovú membránu (western blot).
Western blotting je užitočný pri detekcii protilátok proti HIV vo vzorke ľudského séra. Western blot možno použiť aj ako potvrdzujúci test na infekciu hepatitídou B a definitívny test na chorobu šialených kráv.
Aké sú podobnosti medzi Elisou a Western Blot?
- Elisa a western blot sú dva typy techník používaných na diagnostiku HIV.
- Obe metódy sú založené na imunodetekcii.
- Sú založené na tvorbe komplexu protilátka-proteín.
- Obe metódy dokážu analyzovať proteíny.
- Elisa a Western blotting sú časovo náročné techniky.
- Na vykonávanie týchto techník je potrebný dobre vyškolený a kvalifikovaný personál.
Aký je rozdiel medzi Elisou a Western Blot?
ELISA je veľmi citlivá a veľmi sofistikovaná metóda, ktorá zisťuje prítomnosť antigénu a protilátky v krvi pacienta, zatiaľ čo Western blot je technika, ktorá zisťuje špecifický proteín z proteínovej zmesi. Toto je kľúčový rozdiel medzi Elisou a Western blotom. Elisa je kvalitatívna aj kvantitatívna. Na rozdiel od toho je western blot kvalitatívny. Niekedy je semikvantitatívna. Keď vezmeme do úvahy čas potrebný na test, Elisa test je časovo náročný, zatiaľ čo Western blot je časovo náročnejší ako Elisa.
Nasledujúca infografika sumarizuje rozdiel medzi Elisou a western blotom.
Zhrnutie – Elisa vs Western Blot
ELISA je veľmi citlivá a veľmi sofistikovaná metóda, ktorá zisťuje prítomnosť antigénu a protilátky v našej krvi. Na druhej strane je vyvinutá technika Western blotting na identifikáciu špecifického proteínu z proteínovej zmesi. Toto je kľúčový rozdiel medzi Elisou a Western blotom. ELISA bol prvý test určený na detekciu HIV. Na potvrdenie výsledkov testu ELISA sa môže použiť Western blot. ELISA aj Western Blot sa považujú za nepriame metódy detekcie HIV.
