Kľúčový rozdiel medzi HPLC a GC je v tom, že HPLC používa pevnú stacionárnu fázu a kvapalnú mobilnú fázu, zatiaľ čo GC používa kvapalnú stacionárnu fázu a plynnú mobilnú fázu.
HPLC a GC sú obe metódy separácie zlúčenín zo zmesi. Zatiaľ čo HPLC označuje vysokotlakovú kvapalinovú chromatografiu, GC je jednoducho plynová chromatografia. HPLC sa teda vzťahuje na zložky, ktoré sú tekutinami, ale GC je užitočná, keď sú zlúčeniny plynné alebo zlúčeniny, ktoré sa počas separačného procesu odparujú. Obidve však majú rovnaký základný princíp, že ťažké molekuly prúdia pomalšie ako tie ľahšie.
Čo je HPLC?
HPLC je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia. Ide o typ stĺpcovej chromatografie. Táto technika zahŕňa čerpanie vzorky s rozpúšťadlom (vzorka, ktorá sa má separovať) do kolóny pri vysokom tlaku. Kolóna obsahuje stacionárnu fázu (nepohybuje sa), čo je pevný adsorbent. Komponenty vo vzorke by mali interagovať so stacionárnou fázou.
Obrázok 01: Komponenty HPLC prístroja
Tieto interakcie sa však navzájom líšia pre rôzne zložky vo vzorke. Spôsobuje teda rôzne prietoky pre každú zložku kolónou, a teda vedie k separácii týchto zložiek. Silnejšia interakcia medzi komponentom a stacionárnou fázou, pomalšia elúcia cez kolónu. Preto sa častice so silnejšími interakciami oddeľujú od častíc, ktoré vykazujú slabšie interakcie.
Čo je GC?
GC je plynová chromatografia. Je to tiež technika stĺpcovej chromatografie. Táto technika je užitočná na oddelenie zložiek v zmesiach, ktoré sa ľahko odparujú bez rozkladu. Dve hlavné použitia tejto techniky sú na stanovenie čistoty vzorky a na oddelenie zložiek v zmesi. V niektorých prípadoch pomáha aj pri identifikácii komponentov. Pri tomto spôsobe je mobilnou fázou nosný plyn (pohyblivá fáza), zatiaľ čo stacionárnou fázou je kvapalina (pohyblivá) alebo polymérny materiál na inertnom tuhom nosiči. Obvykle je nosným plynom inertný plyn, ako je hélium alebo dusík. Stacionárna fáza sa nachádza vo vnútri sklenenej kolóny.
Obrázok 02: Prístroj GC
Stručne povedané, fungovanie tejto techniky je nasledovné. Zložky vo vzorke interagujú s kvapalnou stacionárnou fázou. To vedie k rôznym rýchlostiam elúcie pre rôzne zložky, pretože interakcie medzi zložkami vo vzorke a stacionárnou fázou sú navzájom odlišné. Čas, ktorý zložka potrebuje na elúciu cez kolónu, sa nazýva retenčný čas. Analytická užitočnosť techniky GC spočíva v tom, že môžeme porovnať retenčné časy pre každú zložku.
Aký je rozdiel medzi HPLC a GC?
HPLC je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia, zatiaľ čo GC je plynová chromatografia. Kľúčový rozdiel medzi HPLC a GC je v tom, že HPLC používa pevnú stacionárnu fázu a kvapalnú mobilnú fázu, zatiaľ čo GC používa kvapalnú stacionárnu fázu a plynnú mobilnú fázu. Okrem toho je ďalším rozdielom medzi HPLC a GC to, že HPLC a väčšina ostatných chromatografických techník nevyžadujú stratégie regulácie teploty, zatiaľ čo GC potrebuje, aby bola kolóna umiestnená vo vnútri pece, aby sa plynná mobilná fáza udržala tak, ako je. Okrem toho môžeme poukázať na rozdiel medzi HPLC a GC na základe ich použitia. HPLC je užitočná technika na separáciu tekutín, zatiaľ čo GC je užitočná na separáciu zložiek v plynných zmesiach.
Zhrnutie – HPLC vs GC
HPLC aj GC sú chromatografické techniky, ktoré sú užitočné pri separácii rôznych zložiek v zmesi. Kľúčový rozdiel medzi HPLC a GC je v tom, že HPLC používa pevnú stacionárnu fázu a kvapalnú mobilnú fázu, zatiaľ čo GC používa kvapalnú stacionárnu fázu a plynnú mobilnú fázu.