Kľúčový rozdiel medzi RIA a ELISA je v tom, že rádioimunoanalýza (RIA) je technika imunoanalýzy, ktorá využíva rádioizotopy na detekciu komplexov antigén-protilátka, zatiaľ čo enzýmová imunoanalýza (ELISA) je technika imunoanalýzy, ktorá využíva enzýmy na detekciu antigénu -komplexy protilátok.
Detekcia špecifických proteínov, ako sú antigény, je mimoriadne dôležitá pri diagnostike chorôb. Preto sú RIA a ELISA dve techniky imunoanalýzy používané v laboratóriách na rýchlu detekciu špecifických proteínov, najmä antigénov. Vo všeobecnosti sa špecifická protilátka viaže na cieľový antigén a vytvára viditeľný komplex známy ako precipitín. Tieto komplexy protilátok a antigénov možno identifikovať rôznymi technikami. Technika detekcie komplexu antigén-protilátka pomocou rádioizotopov je známa ako RIA a technika detekcie komplexu antigén-protilátka pomocou enzýmov je známa ako ELISA.
Čo je RIA?
Rádioimunoanalýza (RIA) je technika imunoanalýzy, ktorá zisťuje antigény a komplexy protilátok pomocou rádioizotopov. Rosalyn Sussman Yalow vyvinula túto techniku v roku 1960 s pomocou Solomona Bersona. Za tento pozoruhodný objav získala Rosalyn Sussman Yalow v roku 1977 Nobelovu cenu za medicínu. Pri rádioimunoanalýze je známe množstvo antigénu najskôr rádioaktívne. antigény. Tieto rádioizotopy sa normálne viažu na tyrozínovú aminokyselinu antigénu. Potom sa rádioaktívne značený antigén zmieša s protilátkou. V dôsledku toho sa rádioaktívne značený antigén a protilátka špecificky viažu na seba.
Neskôr sa pridá vzorka séra, ktorá obsahuje neznáme množstvo rovnakého antigénu. To spôsobí, že neoznačený antigén zo séra súťaží s rádioaktívne označeným antigénom o väzbové miesta protilátky. Keď sa koncentrácia neznačeného antigénu zvyšuje, viac sa ho viaže na protilátku, čím sa vytláča rádioaktívne označený variant. Znižuje teda pomer rádioaktívne značeného antigénu naviazaného na protilátku k voľnému rádioaktívne značenému antigénu. Na konci postupu sa naviazané antigény oddelia. Nakoniec sa rádioaktivita voľných antigénov v zostávajúcom supernatante meria pomocou gama počítača.
Čo je ELISA?
ELISA je technika imunotestu, ktorá deteguje komplexy antigénov a protilátok pomocou enzýmov. Je to biochemický analytický test, ktorý prvýkrát opísali Engvall a Perlmann v roku 1971. Vo väčšine jednoduchých foriem techník ELISA sú antigény vzorky pacienta pripojené k pevnému povrchu. Potom sa na povrch aplikuje zodpovedajúca protilátka, aby sa mohla naviazať na antigén.
Obrázok 01: ELISA
Táto konkrétna protilátka je spojená s enzýmom. Neskôr sa všetky nenaviazané protilátky odstránia umytím detergentom. V poslednom kroku tejto techniky sa pridá substrát enzýmu. Ak dôjde k správnej väzbe antigénu a protilátky, následná reakcia vytvorí detekovateľný farebný signál, najčastejšie zmenu farby.
Aké sú podobnosti medzi RIA a ELISA?
- RIA a ELISA sú techniky imunotestov.
- Obe techniky vytvárajú antigén a protilátkový komplex.
- Tieto techniky možno použiť na detekciu neznámych proteínov vo vzorkách.
- Obe sa používajú na diagnostiku chorôb v laboratóriách.
- Obe sú vysoko špecifické a citlivé techniky.
Aký je rozdiel medzi RIA a ELISA?
RIA je technika imunotestu na detekciu komplexu antigén-protilátka pomocou rádioizotopov. ELISA je imunoanalytická technika na detekciu komplexu antigén-protilátka pomocou enzýmov. Toto je kľúčový rozdiel medzi RIA a ELISA. Navyše v technike RIA je antigén označený, ale v ELISA je označená protilátka. Okrem toho v technike RIA sú značiace molekuly rádioizotopy, zatiaľ čo v ELISA sú značiace molekuly enzýmy. Toto je ďalší rozdiel medzi RIA a ELISA.
Nižšie uvedená infografika ukazuje ďalšie rozdiely medzi RIA a ELISA v tabuľkovej forme.
Súhrn – RIA vs ELISA
Imunotesty hrajú veľmi dôležitú úlohu v rôznych bioanalytických nastaveniach, ako je klinická diagnostika, biofarmaceutická analýza, monitorovanie životného prostredia, biologická bezpečnosť a testovanie potravín. Od 60. rokov 20. storočia bola vyvinutá široká škála imunotestov. RIA aj ELISA sú techniky imunotestov. RIA je imunoanalytická technika na detekciu komplexu antigén-protilátka pomocou rádioizotopov. ELISA je imunoanalytická technika na detekciu komplexu antigén-protilátka pomocou enzýmov. Toto je zhrnutie rozdielu medzi RIA a ELISA.
