Kľúčový rozdiel – priľnavé a závesné bunkové línie
Bunková línia je trvalo zavedená bunková kultúra, ktorá sa môže množiť a pestovať za špeciálnych podmienok. Niekoľko bunkových línií, ako sú rakovinové bunkové línie, hepatocyty a bunky kostnej drene, sú udržiavané ako bunkové línie pre uľahčenie výskumu. Bunkové línie sa pripravujú z primárnych kultúr a môžu byť prevažne dvoch typov, a to adherentné bunkové kultúry a suspenzné bunkové kultúry. Bunkové línie odvodené z týchto kultúr sa teda označujú ako adherentné bunkové línie a suspenzné bunkové línie. Adherentné bunkové línie sú bunkové línie, v ktorých sú primárne kultúry pripojené k pevnej podložke, a teda sú to bunky závislé od ukotvenia. Suspenzné bunkové línie sú bunkové línie, v ktorých sú kultúry suspendované v tekutom médiu a bunky tak zostávajú v tekutom médiu. Nie sú závislé na ukotvení. Kľúčovým rozdielom medzi bunkovými líniami Adherent a Suspension je závislosť buniek od ukotvenia. Adherentné bunkové línie potrebujú pevnú podporu pre svoj rast, a preto sú závislé od ukotvenia, zatiaľ čo suspenzné bunkové línie sú nezávislé od ukotvenia a nepotrebujú pevnú podporu pre rast.
Čo sú adherentné bunkové línie?
Adherentné bunkové línie sú bunkové línie, ktoré sú závislé od ukotvenia. Preto tieto bunkové línie vyžadujú stabilnú podporu pre svoj rast. Väčšina extrahovaných buniek stavovcov (okrem hematopoetických buniek) je závislá od ukotvenia. Preto sa väčšina buniek stavovcov kultivuje spolu s adherentom, ktorý zabezpečí stabilný rast buniek.
Väčšina adherentných bunkových línií je založená v nádobe ošetrenej tkanivovou kultúrou a ich rast je obmedzený na oblasť cievy alebo adherentu. Pri ošetrení buniek na kultiváciu adherentných bunkových línií by sa bunky mali disociovať prostredníctvom trypsinizácie a potom by sa mali aplikovať techniky opakovaného pasážovania na vytvorenie adherentných bunkových línií. Bežné aplikácie bunkových línií pripravených z adherentných kultúr sú v cytológii a v cytogenetike. Používajú sa aj na výskumné účely.
Čo sú línie závesných buniek?
Suspenzné bunkové línie sú nezávislé od ukotvenia. Sú odvodené zo suspenznej kultúry, ktorá môže ľahko rásť v suspendovanom kvapalnom médiu. Suspenzné bunkové kultúry by sa mali nepretržite miešať, aby sa udržal ich rast. Ľudské krvotvorné bunky sa kultivujú hlavne ako suspenzné kultúry, a preto sa udržiavajú ako suspenzné bunkové línie, keď sa používajú na výskumné účely.
Údržba suspenzných bunkových línií vyžaduje nepretržité miešanie a niekoľko pasáží. Rast suspenzných buniek je obmedzený koncentráciou buniek v médiu. Postupom času sa teda rastové faktory a zložky média vyčerpávajú, čo obmedzuje rast buniek.
Obrázok 01: Suspenzná kultúra Pseudomonas spp
Suspenzné bunkové línie sú najpoužívanejším typom primárnych bunkových línií v komerčnej výrobe. Väčšina mikrobiálnych buniek je udržiavaná ako suspenzné bunky, kde sa používajú na extrakciu užitočných sekundárnych metabolitov, ako sú antibiotiká, vitamíny, aminokyseliny a proteíny. Kultúry suspenzných bunkových línií poskytujú oveľa vyššie produkty ako adherentné bunkové línie a sú menej pracné a vyžadujú menšie výdavky v porovnaní s adherentnými bunkovými líniami.
Aké sú podobnosti medzi adherentnými a závesnými bunkovými líniami?
- Adherentné aj suspenzné bunkové línie pochádzajú z primárnych bunkových kultúr.
- Adherentné aj suspenzné bunkové línie vyžadujú optimálne podmienky média a rastové podmienky, aby bol umožnený maximálny rast.
- Adherentné aj suspenzné bunkové línie sa pripravujú v podmienkach in vitro a môžu sa skladovať za špeciálnych podmienok skladovania.
- Adherentné aj suspenzné bunkové línie vyžadujú kontinuálne pasážovanie, aby sa zvýšil výťažok.
- Adherentné aj suspenzné bunkové línie sa používajú v technikách tkanivových kultúr, vo farmakologických štúdiách na hodnotenie metabolizmu liečiv a pri diagnostike chorôb.
Aký je rozdiel medzi adherentnými a závesnými bunkovými líniami?
Adherent verzus Suspension Cell Lines |
|
| Adherentné bunkové línie sú bunkové línie, v ktorých sú primárne kultúry pripojené k pevnej podložke. | Suspenzné bunkové línie sú bunkové línie, v ktorých sú kultúry suspendované v tekutom médiu a bunky tak zostávajú v tekutom médiu. |
| Anchorage Dependency | |
| Adherentné bunkové línie sú závislé od ukotvenia. | Suspenzné bunkové línie sú nezávislé na ukotvení. |
| Agitácia | |
| Adherentné bunkové línie nevyžadujú miešanie. | Suspenzné bunkové línie vyžadujú pretrepávanie. |
| Trypsinizácia | |
| Trypsinizácia je prítomná v adherentných bunkových líniách. | V suspenzných bunkových líniách chýba trypsinizácia. |
| Cievy ošetrené tkanivovou kultúrou | |
| Vyžaduje sa v adherentných bunkových líniách. | V suspenzných bunkových líniách sa nevyžaduje. |
| Výnos | |
| Adherentné bunkové línie majú za následok nižší výťažok. | Suspenzné bunkové línie vedú k vyššiemu výťažku. |
Zhrnutie – Adherentné vs. Suspenzné bunkové línie
Udržiavanie bunkových línií je dôležitý proces pri kultivácii buniek pre živočíšne bunkové kultúry, ako aj pre rastlinné tkanivové kultúry. Okrem toho sa udržiavajú bunkové línie aj pre mikrobiálne bunky, ktoré sa široko používajú v priemyselných procesoch. Bunkové línie môžu byť buď označené ako adherentné bunkové línie alebo suspenzné bunkové línie. Adherentné bunkové línie sú odvodené z adherentných primárnych bunkových kultúr a sú závislé od ukotvenia. Suspenzné bunkové línie sú odvodené zo suspenzných primárnych bunkových kultúr. Tieto bunky existujú v tekutom médiu a na rast buniek je potrebné neustále premiešavanie buniek. Toto je rozdiel medzi adherentnými bunkovými líniami a suspenznými bunkovými líniami.
