Kľúčový rozdiel medzi adherentnými a suspenznými bunkami je v tom, že adherentné bunky potrebujú pevnú podporu pre svoj rast, zatiaľ čo suspenzné bunky pevnú podporu pre rast nepotrebujú.
Bunka je základná štrukturálna a funkčná jednotka organizmu. Rôzne výskumné projekty vyžadujú prípravu bunkových kultúr. Rakovinové bunky, hepatocyty, obličkové bunky a rôzne mikrobiálne bunky sú niektoré z bežných buniek, ktoré sa používajú pri kultivácii buniek. Vo všetkých procesoch kultivácie buniek je potrebné mať primárnu bunkovú kultúru na vytvorenie bunkových línií. Pri príprave bunkových kultúr existujú bunky v dvoch formách buď ako adherentné bunky alebo ako suspenzné bunky. V adherentných bunkách potrebujú bunky primárnej kultúry na prichytenie pevnú podporu. Preto sú to bunky závislé od ukotvenia. Ale v suspenzných bunkách bunky primárnej kultúry nepotrebujú pevnú podporu na pripojenie. Ponoria sa do tekutého média. Preto nie sú závislé od ukotvenia. Celkovo je kľúčovým rozdielom medzi adherentnými a suspenznými bunkami závislosť buniek od ukotvenia.
Čo sú to adherentné bunky?
Adherentné bunkové línie sú bunky, ktoré sú závislé od ukotvenia. Preto tieto bunky vyžadujú pre svoj rast stabilnú podporu, ktorá sa nazýva adherentná. Väčšina buniek odvodených z buniek stavovcov (okrem hematopoetických buniek) je závislá od ukotvenia. Preto udržiavanie väčšiny buniek stavovcov vyžaduje adherent, ktorý poskytuje stabilný rast týchto buniek.
Obrázok 01: Adherentné bunky
Väčšina adherentných bunkových línií vytvorených v cievach ošetrených tkanivovou kultúrou. Preto sa ich rast vždy obmedzuje na oblasť cievy alebo adherentu. Pri príprave adherentných bunkových línií musia byť adherentné bunky trypsinizované. Pred prípravou adherentnej bunkovej línie sa tiež uskutočňuje opakované pasážovanie buniek. Adherentné bunkové línie sú cenné v cytogenetike a v rôznych výskumných projektoch.
Čo sú závesné články?
Závesné články sú nezávislé na ukotvení. Preto môžu tieto bunky ľahko rásť suspendované v kvapalnom médiu. Pre zabezpečenie optimálnych podmienok pre ich rast je potrebné médium kontinuálne miešať miešaním. Ľudské hematopoetické bunky sú jednou zo suspenzných bunkových kultúr, ktoré sa bežne pripravujú v laboratóriách. Je to spôsobené tým, že pre svoj rast nepotrebujú žiadnu pevnú oporu pre atašé.
Údržba suspenzných buniek vyžaduje nepretržité miešanie a niekoľko pasáží. Najdôležitejšie je, že koncentrácia živín v médiu obmedzuje rast buniek v médiu. V priebehu času sa teda rastové faktory a zložky média vyčerpávajú, čo obmedzuje rast buniek. Preto je nanajvýš dôležité udržiavať všetky požiadavky na optimálnej úrovni, aby sa dosiahol správny rast suspenzných buniek.
Obrázok 02: Suspenzné bunky v bioreaktore
V komerčných aplikáciách sú suspenzné bunky najrozšírenejším typom primárnych bunkových línií. Pri kontinuálnej aj vsádzkovej fermentácii pôsobí aktívna suspenzná bunková kultúra ako východisková kultúra. Okrem toho suspenzné bunkové kultúry poskytujú oveľa vyššie produkty ako adherentné bunkové línie. Ďalšou výhodou suspenzných buniek oproti adherentným bunkám je, že príprava suspenzných buniek je menej pracná a vyžaduje menšie výdavky v porovnaní s adherentnými bunkami. Produkciu sekundárnych metabolitov, ako sú antibiotiká, vitamíny, aminokyseliny, bielkoviny atď., je preto možné jednoducho uskutočniť pomocou suspenzných bunkových kultúr.
Aké sú podobnosti medzi priľnavými a závesnými bunkami?
- Adherentné a suspenzné bunky sú dva typy buniek, ktoré pochádzajú z primárnych bunkových kultúr.
- Obe vyžadujú optimálne podmienky média a rastové podmienky na dosiahnutie maxima
- Obidve sú pripravené v podmienkach in vitro a môžu sa skladovať za špeciálnych podmienok skladovania.
- Na zvýšenie výťažnosti vyžadujú nepretržité pasážovanie.
- Majú využitie vo výskume a na experimentálne účely.
- Obe bunky môžu byť transformované do príslušných bunkových línií.
Aký je rozdiel medzi priľnavými a závesnými článkami?
Adherentné bunky, ako už názov napovedá, rastú pripojené k povrchu. Na rozdiel od toho suspenzné bunky rastú v kvapalnom médiu bez toho, aby sa pripojili k povrchu. Toto je hlavný rozdiel medzi adherentnými a suspenznými bunkami. Okrem toho sa rast adherentných buniek obmedzuje len na povrchovú plochu adherentných buniek, zatiaľ čo v prípade suspenzných buniek takéto obmedzenie neexistuje. Avšak mnohé faktory, ako je prevzdušňovanie, zložky média, teplota, pH atď. obmedzujú rast suspenzných buniek.
Nasledujúca infografika poskytuje viac faktov o rozdieloch medzi adherentnými a suspenznými bunkami,
Zhrnutie – priľnavé verzus závesné bunky
Keď primárne bunky pestujeme v tekutom médiu, stáva sa z toho suspenzná bunková kultúra. Na rozdiel od toho, keď dovolíme primárnym bunkám pripojiť sa k pevnému povrchu a rásť, stane sa z nich adherentná bunková kultúra. Toto je hlavný rozdiel medzi adherentnými a suspenznými bunkami. Takže adherentné bunky sú závislé od ukotvenia, zatiaľ čo suspenzné bunky sú nezávislé od ukotvenia. Okrem toho udržiavanie suspenzných buniek vyžaduje kontinuálne miešanie média, na rozdiel od adherentných buniek. Adherentné aj suspenzné bunky sa však môžu premeniť na bunkové línie, ktoré sú užitočné pri výskumných účeloch a štúdiách bunkových kultúr.
