Kľúčový rozdiel medzi absorbanciou a fluorescenciou je v tom, že môžeme použiť techniku analýzy absorbancie na priame meranie množstva špecifickej vlnovej dĺžky, ktorá je absorbovaná vzorkou bez riedenia alebo prípravy testu, zatiaľ čo fluorescenčná analýza vyžaduje prípravu vzorky, v ktorej vzorka, ktorá je predmetom záujmu, musí byť spojená s fluorescenčnými činidlami v testovacej súprave.
Absorpcia a fluorescencia sú dôležité analytické techniky, ktoré môžeme použiť na detekciu rôznych vlastností v danej vzorke.
Čo je absorbancia?
Absorpcia je miera schopnosti látky absorbovať svetlo určitej vlnovej dĺžky. Konkrétne sa rovná logaritmu prevrátenej hodnoty priepustnosti. Na rozdiel od optickej hustoty absorbancia meria množstvo svetla absorbovaného látkou.
Spektroskopia navyše meria absorbanciu (pomocou kolorimetra alebo spektrofotometra). Absorbancia je bezrozmerná vlastnosť, na rozdiel od väčšiny iných fyzikálnych vlastností. Absorbanciu možno vysvetliť dvoma spôsobmi: ako svetlo absorbované vzorkou alebo ako svetlo prechádzajúce cez vzorku. Rovnica na výpočet absorbancie je nasledovná:
A=log10(I0/I)
Kde A je absorbancia, I0 je žiarenie prenášané zo vzorky a I je dopadajúce žiarenie. Nasledujúca rovnica je tiež podobná vyššie uvedenej rovnici z hľadiska priepustnosti (T).
A=-log10T
Čo je fluorescencia?
Fluorescencia je emisia svetla z látky, ktorá predtým absorbovala energiu. Takéto látky musia absorbovať svetlo alebo akékoľvek iné elektromagnetické žiarenie, aby emitovali svetlo vo forme fluorescencie. Okrem toho je toto vyžarované svetlo druhom luminiscencie, čo znamená, že sa vyžaruje spontánne. Vyžarované svetlo má často dlhšiu vlnovú dĺžku ako absorbované svetlo. To znamená, že vyžarovaná svetelná energia je nižšia ako absorbovaná energia.
Počas procesu fluorescencie sa svetlo vyžaruje v dôsledku excitácie atómov v látke. Absorbovaná energia sa často uvoľňuje ako luminiscencia vo veľmi krátkom časovom období, približne 10-8 sekúnd. To znamená, že môžeme pozorovať fluorescenciu hneď, ako odstránime zdroj žiarenia, ktorý spôsobuje excitáciu.
Existuje mnoho aplikácií fluorescencie v rôznych oblastiach, ako je mineralógia, gemológia, medicína, chemické senzory, biochemický výskum, farbivá, biologické detektory, výroba žiariviek atď. Navyše tento proces môžeme považovať aj za prirodzený; napríklad v niektorých mineráloch.
Aký je rozdiel medzi absorbanciou a fluorescenciou?
Absorpcia a fluorescencia sú dôležité analytické techniky, ktoré môžeme použiť na detekciu rôznych vlastností v danej vzorke. Kľúčový rozdiel medzi absorbanciou a fluorescenciou je v tom, že môžeme použiť techniku analýzy absorbancie na priame meranie množstva špecifickej vlnovej dĺžky, ktorá je absorbovaná vzorkou bez riedenia alebo prípravy testu, zatiaľ čo fluorescenčná analýza vyžaduje prípravu vzorky, v ktorej musí byť požadovaná vzorka viazané s fluorescenčnými činidlami v testovacej súprave. Okrem toho je fluorescenčná technika účinnejšia ako absorbancia, pretože fluorescenčný test je vysoko špecifický pre cieľový analyt.
Nižšie uvedená infografika predstavuje rozdiely medzi absorbanciou a fluorescenciou v tabuľkovej forme na porovnanie vedľa seba
Zhrnutie – Absorbancia verzus fluorescencia
Absorpcia je miera schopnosti látky absorbovať svetlo určitej vlnovej dĺžky. Fluorescencia je emisia svetla z látky, ktorá predtým absorbovala energiu. Kľúčový rozdiel medzi absorbanciou a fluorescenciou je v tom, že môžeme použiť techniku analýzy absorbancie na priame meranie množstva špecifickej vlnovej dĺžky, ktorá je absorbovaná vzorkou bez riedenia alebo prípravy testu, zatiaľ čo fluorescenčná analýza vyžaduje prípravu vzorky, v ktorej musí byť požadovaná vzorka naviazané na fluorescenčné činidlá v testovacej súprave.
