Kľúčový rozdiel medzi ustáleným stavom a časovo rozlíšenou fluorescenciou je v tom, že ustálená fluorescencia zahŕňa štúdium dlhodobej priemernej fluorescencie vzorky pri ožiarení UV, viditeľným alebo blízkym IR svetlom, zatiaľ čo časovo rozlíšená fluorescencia zahŕňa štúdium fluorescencie vzorky, ktorá je monitorovaná ako funkcia času po excitácii svetelným impulzom.
Fluorescencia môže byť definovaná ako viditeľné alebo neviditeľné žiarenie, ktoré vyžaruje látka v dôsledku dopadajúceho žiarenia krátkej vlnovej dĺžky. Inými slovami, ide o emisiu svetla látkou, ktorá absorbuje svetlo alebo iné typy EMR (elektromagnetického žiarenia). Najbežnejším príkladom fluorescencie je absorpcia žiarenia v UV oblasti spektra vzorkou (ktorá je pre nás neviditeľná) a vyžarovanie svetla vo viditeľnej oblasti. To dáva vzorke zreteľnú farbu, ktorá je pozorovateľná iba pod UV svetlom. Okrem toho majú fluorescenčné materiály tendenciu žiariť takmer okamžite po odstránení zdroja žiarenia.
Čo je fluorescencia v ustálenom stave?
Ustálená fluorescencia je analytická technika, ktorá študuje dlhodobú priemernú fluorescenciu vzorky po ožiarení tejto vzorky UV, viditeľným alebo blízkym IR svetlom. Aplikácie ustálenej fluorescencie zahŕňajú skenovanie excitácie a emisie, synchrónne skenovanie a mapy, anizotropiu fluorescencie v ustálenom stave, mapy excitácie a emisie, kinetické merania a teplotné mapy.
Čo je časovo rozlíšená fluorescencia?
Časovo rozlíšená fluorescencia je analytická technika, ktorá študuje fluorescenciu vzorky, ktorá sa monitoruje ako funkcia času po excitácii svetelným impulzom. Môžeme to nazvať rozšírením fluorescenčnej spektroskopie. Pri tejto technike potrebujeme monitorovať vzorku (po jej excitácii zábleskom svetla) ako funkciu času.
Existujú rôzne spôsoby, ako môžeme získať časovo rozlíšenú fluorescenciu, vrátane elektroniky rýchlej detekcie, časovo korelovaného počítania jednotlivých fotónov, streak kamery, zosilnených CCD kamier, optického hradlovania atď. rozlíšená fluorescencia, konvolučný integrál sa používa na výpočet životnosti z rozpadu fluorescencie.
Aký je rozdiel medzi ustáleným stavom a časovo rozlíšenou fluorescenciou?
Fluorescencia môže byť definovaná ako viditeľné alebo neviditeľné žiarenie, ktoré vyžaruje látka v dôsledku dopadajúceho žiarenia krátkej vlnovej dĺžky. Existujú dva deriváty fluorescencie ako fluorescencia v ustálenom stave a časovo rozlíšená fluorescencia. Kľúčový rozdiel medzi ustáleným stavom a časovo rozlíšenou fluorescenciou je v tom, že ustálená fluorescencia zahŕňa štúdium dlhodobej priemernej fluorescencie vzorky pri ožiarení UV, viditeľným alebo blízkym IR svetlom, zatiaľ čo časovo rozlíšená fluorescencia zahŕňa štúdium fluorescencia vzorky, ktorá je monitorovaná ako funkcia času po excitácii svetelným impulzom.
Ustálená fluorescencia sa používa pri excitačných a emisných skenoch, synchrónnych skenoch a mapách, anizotropii fluorescencie v ustálenom stave, excitačno-emisných mapách, kinetických meraniach a teplotných mapách. Časovo rozlíšená fluorescencia sa na druhej strane používa v systémoch TR-FRET (časovo rozlíšený fluorescenčný prenos energie)
Nasledujúca tabuľka sumarizuje rozdiel medzi ustáleným stavom a časovo rozlíšenou fluorescenciou.
Súhrn – ustálený stav vs. časom rozlíšená fluorescencia
Ustálená fluorescencia a časovo rozlíšená fluorescencia sú veľmi dôležité prístupy v analytickej a fyzikálnej chémii. Kľúčový rozdiel medzi ustáleným stavom a časovo rozlíšenou fluorescenciou je v tom, že ustálená fluorescencia zahŕňa štúdium dlhodobej priemernej fluorescencie vzorky pri ožiarení UV, viditeľným alebo blízkym IR svetlom, zatiaľ čo časovo rozlíšená fluorescencia zahŕňa štúdium fluorescencie vzorky, ktorá je monitorovaná ako funkcia času po excitácii svetelným impulzom.
