Kľúčový rozdiel medzi izoláciou DNA a RNA je v tom, že izolácia DNA je postup, pri ktorom sa z biologickej bunky extrahuje typ nukleovej kyseliny nazývanej DNA, zatiaľ čo izolácia RNA je postup, pri ktorom sa získava typ nukleovej kyseliny nazývaný RNA. extrahovaný z biologickej bunky.
Izolácia nukleových kyselín je východiskovým bodom v širokej škále následných aplikácií. Vysoká kvalita nukleových kyselín vo východiskových vzorkách je kľúčovým faktorom úspechu následných aplikácií. Izolácia nukleovej kyseliny by mohla byť definovaná ako séria krokov na získanie nukleovej kyseliny vo vzorke čistoty, ktorá sa môže použiť na rôzne následné aplikačné kroky. Účelom extrakcie nukleových kyselín je dezintegrovať bunkovú membránu a dosiahnuť maximálnu elimináciu lipidov a proteínov, aby sa získali čisté nukleové kyseliny ako DNA alebo RNA.
Čo je izolácia DNA?
Izolácia DNA je rutinný postup, pri ktorom sa z biologickej bunky extrahuje typ nukleovej kyseliny nazývaný DNA. Izolácia DNA sa vykonáva extrakciou DNA z krvi, zmrazených vzoriek tkaniva a blokov parafínového tkaniva. Existujú tri hlavné kroky v izolácii DNA, vrátane bunkovej lýzy, extrakcie DNA a precipitácie. Pri bunkovej lýze sa bunky vo vzorke od seba často oddelia fyzikálnymi prostriedkami, ako je mletie alebo vortexovanie, a vložia sa do roztoku obsahujúceho soľ. Zvyčajne kladne nabité sodné ióny v soli pomáhajú chrániť negatívne nabité fosfátové skupiny, ktoré prebiehajú pozdĺž hlavného reťazca DNA. Neskôr sa pridá detergent, ktorý rozloží lipidy v bunkovej membráne a jadrách, ktoré pri narušení týchto membrán uvoľňujú DNA.
Obrázok 01: Izolácia DNA
Extrakcia DNA sa vykonáva na získanie čistej vzorky DNA. Na degradáciu proteínov spojených s DNA a iných bunkových proteínov sa často pridáva enzým proteáza. Okrem toho je možné časť bunkového odpadu odstrániť filtráciou vzorky. Nakoniec sa DNA vyzráža použitím alkoholu. Okrem toho, ak je tam veľa DNA, na konci postupu možno pozorovať štipľavú bielu zrazeninu.
Čo je izolácia RNA?
Izolácia RNA je postup, pri ktorom sa z biologickej bunky extrahuje typ nukleovej kyseliny nazývaný RNA. Tento postup je často komplikovaný prítomnosťou ribonukleázových enzýmov v bunkách a tkanivách, ktoré degradujú RNA. Na izoláciu RNA zo vzoriek sa v molekulárnej biológii používa niekoľko metód, ako je extrakcia guanidínium-tiokyanátom-fenol-chloroformom.
Obrázok 02: Izolácia RNA
Izolácia RNA zvyčajne pozostáva z niekoľkých krokov vrátane lýzy a homogenizácie buniek, potlačenia biochemických procesov, rozdelenia nukleových kyselín, získania RNA, surovej purifikácie a hodnotenia kvality RNA. Metóda lýzy a elúcie na filtračnom papieri má vysokú kapacitu pri extrakcii RNA. Extrakcia RNA v tekutom dusíku pomocou trecej misky s paličkou je tiež veľmi užitočná metóda, pretože zabraňuje aktivite ribonukleázy.
Aké sú podobnosti medzi izoláciou DNA a RNA?
- Izolácia DNA a RNA sú dva typy postupov izolácie nukleových kyselín.
- Oba postupy majú podobné základné kroky, ako je lýza buniek, extrakcia a purifikácia.
- Tieto postupy izolujú dôležité typy nukleových kyselín, ktoré majú množstvo následných aplikácií.
- Vykonávajú sa v laboratórnych podmienkach.
- Dajú sa vykonať pomocou vyrobených súprav.
Aký je rozdiel medzi izoláciou DNA a RNA?
Pri izolácii DNA sa z biologickej bunky extrahuje typ nukleovej kyseliny nazývaný DNA, zatiaľ čo pri izolácii RNA sa z biologickej bunky extrahuje typ nukleovej kyseliny nazývaný RNA. Toto je kľúčový rozdiel medzi izoláciou DNA a RNA. Okrem toho sa izolácia DNA normálne vykonáva pri pH približne 7 až 8, zatiaľ čo izolácia RNA sa normálne vykonáva pri pH približne 4,5.
Nižšie uvedená infografika predstavuje rozdiely medzi izoláciou DNA a RNA v tabuľkovej forme na porovnanie vedľa seba.
Súhrn – DNA vs izolácia RNA
Izolácia DNA a RNA sú dva typy postupov izolácie nukleových kyselín. Izolácia DNA je postup, počas ktorého sa DNA extrahuje z biologickej bunky. Izolácia RNA je postup, počas ktorého sa RNA extrahuje z biologickej bunky. Toto je kľúčový rozdiel medzi izoláciou DNA a RNA.
