Kľúčový rozdiel medzi UV vis a fluorescenčnou spektroskopiou je ten, že UV-viditeľná spektroskopia meria absorpciu svetla v UV-viditeľnom rozsahu, zatiaľ čo fluorescenčná spektroskopia meria svetlo emitované vzorkou vo fluorescenčnom rozsahu po absorpcii svetla pri vyššia energia ako úroveň vyžarovanej energie.
Spektroskopia je technika na meranie absorpcie a emisie svetla a iného žiarenia hmotou.
Čo je UV-Vis spektroskopia?
UV viditeľná spektroskopia je analytická technika, ktorá využíva absorpciu alebo odrazivosť časti UV rozsahu a celých priľahlých viditeľných oblastí elektromagnetického spektra. Táto technika sa dodáva v dvoch typoch; sú to absorpčná spektroskopia a odrazová spektroskopia. Používa svetlo vo viditeľnom a priľahlom rozsahu.
Vo všeobecnosti môže absorpcia alebo odrazivosť viditeľného rozsahu svetla priamo ovplyvniť vnímanú farbu chemikálií, ktoré sa podieľajú na procese. V tomto rozsahu spektra môžeme pozorovať, že atómy a molekuly môžu podliehať elektronickým prechodom. Absorpčná spektroskopia je tu komplementárna k fluorescenčnej spektroskopii, kde sa fluorescencia zaoberá prechodmi elektrónov z excitovaného stavu do základného stavu. Okrem toho absorpcia meria prechody zo základného stavu do excitovaného stavu.
Obrázok 01: UV viditeľná spektroskopia
Táto spektroskopická technika je užitočná pri kvantitatívnej analýze rôznych vzoriek, ako sú ióny prechodných kovov, vysoko konjugované organické zlúčeniny a makromolekuly v biologických systémoch. Vo všeobecnosti sa spektroskopická analýza vykonáva pomocou roztokov, ale môžeme použiť aj pevné látky a plyny.
Čo je fluorescenčná spektroskopia?
Fluorescenčná spektroskopia je typ elektromagnetickej spektroskopie, ktorý je užitočný pri analýze fluorescencie zo vzorky. Táto technika zahŕňa použitie lúča svetla (ako je UV) na excitáciu elektrónov v molekulách niektorých zlúčenín a môže spôsobiť, že vyžarujú svetlo. Toto vyžarovanie je zvyčajne viditeľné svetlo, ale nie nevyhnutne rovnaké.
Obrázok 02: Fluorescenčná spektroskopia
Molekuly majú zvyčajne rôzne stavy, ktoré sú známe ako energetické hladiny. Táto technika sa primárne týka elektronických a vibračných stavov. Vzorka analytu má často molekuly v základnom elektronickom stave a excitovanom stave s vyššou energiou. Tieto dva elektronické stavy majú medzi sebou rôzne vibračné stavy. Počas procesu fluorescencie sú chemické druhy excitované absorbovaním fotónov a pohybujú sa zo základného stavu na vyššiu energetickú hladinu. Potom zrážky medzi inými molekulami spôsobia, že excitované molekuly stratia vibračnú energiu, kým z tohto excitovaného stavu neprídu do nízkovibračného stavu. To vyžaruje fotóny s rôznymi energiami a rôznymi frekvenciami. Toto sa nazýva fluorescencia. Môžeme analyzovať tieto rôzne frekvencie emitované týmto spôsobom, aby sme určili rôzne úrovne vibrácií.
Aký je rozdiel medzi UV Vis a fluorescenčnou spektroskopiou?
Spektroskopické techniky sú užitočné pri štúdiu vlastností rôznych chemických látok. Kľúčový rozdiel medzi UV vis a fluorescenčnou spektroskopiou je v tom, že UV-viditeľná spektroskopia meria absorpciu svetla v UV viditeľnom rozsahu, zatiaľ čo fluorescenčná spektroskopia meria svetlo vyžarované vzorkou vo fluorescenčnom rozsahu po absorpcii svetla s vysokou energiou ako emitované. energetická úroveň. Fluorescenčná spektroskopia je navyše citlivejšia ako UV-viditeľná spektroskopia.
Nižšie uvedená infografika predstavuje rozdiely medzi UV vis a fluorescenčnou spektroskopiou v tabuľkovej forme na porovnanie vedľa seba.
Zhrnutie – UV Vis vs fluorescenčná spektroskopia
Spektroskopia je dôležitá analytická technika. Existujú rôzne typy spektroskopií, ako je IR spektroskopia, UV viditeľná spektroskopia, fluorescenčná spektroskopia atď. Kľúčový rozdiel medzi UV vis a fluorescenčnou spektroskopiou je v tom, že UV spektroskopia meria absorpciu svetla v UV viditeľnom rozsahu, zatiaľ čo fluorescencia spektroskopia meria svetlo vyžarované vzorkou v rozsahu fluorescencie po absorpcii svetla s vysokou energiou, než je úroveň vyžarovanej energie.
