Kľúčový rozdiel medzi kyvadlovým vektorom a expresným vektorom je ten, že kyvadlový vektor je zvyčajne plazmid, ktorý nie je určený na štúdie génovej expresie v bunkách, zatiaľ čo expresný vektor je zvyčajne plazmid alebo vírus, ktorý je určený na štúdie génovej expresie v bunky.
V molekulárnej biológii je vektor molekula DNA používaná ako nosič na prenos cudzieho genetického materiálu do inej bunky, kde sa môže replikovať alebo exprimovať. Vektor prichádzajúci do kontaktu s cudzím genetickým materiálom sa všeobecne nazýva molekula rekombinantnej DNA. Štyri hlavné typy vektorov sú plazmidy, vírusové vektory, kozmidy a umelé chromozómy. Spomedzi nich sú najbežnejšie používanými vektormi plazmidy. Shuttle vector a expresný vektor sú dva typy vektorov používaných v molekulárnej biológii.
Čo je to kyvadlový vektor?
Vektor kyvadlovej dopravy je vektor určený na rozmnožovanie v dvoch rôznych hostiteľských druhoch. Cudzia DNA vložená do kyvadlového vektora môže byť teda testovaná alebo manipulovaná v dvoch rôznych typoch buniek. Normálne má kyvadlový vektor dva počiatky replikácií, z ktorých každý je špecifický pre hostiteľa. Keďže sa kyvadlové vektory replikujú v dvoch rôznych hostiteľoch, sú tiež známe ako bifunkčné vektory. Jeden populárny kyvadlový vektor je kvasinkový kyvadlový vektor. Navyše takmer všetky bežne používané vektory Saccharomyces cerevisiae sú kyvadlové vektory. Napríklad kvasinkový kyvadlový vektor obsahuje zložky, ktoré umožňujú replikáciu a selekciu tak v kvasinkových bunkách, ako aj v bunkách E. coli. Zložky E. coli kvasinkového kyvadlového vektora sú počiatkom replikácie a selektovateľným markerom (napr.rezistencia na antibiotiká, beta-laktamáza). Kvasinkové zložky kvasinkového kyvadlového vektora sú autonómne sa replikujúce sekvencie (ARS), kvasinková centroméra (CEN) a selektovateľný kvasinkový marker (napr. URA3 – gén, ktorý kóduje enzým na syntézu uracilu)
Čo je to výrazový vektor?
Expresný vektor je zvyčajne plazmid alebo vírus skonštruovaný na génovú expresiu v bunkách. Tento vektor sa používa na zavedenie špecifického génu do cieľovej bunky. Tento vektor môže prevziať kontrolu nad bunkovým mechanizmom syntézy proteínov na produkciu proteínu kódovaného špecifickým génom. Akonáhle je expresný vektor vo vnútri bunky, proteín, ktorý je kódovaný cudzím génom, je produkovaný pomocou bunkových translačných mechanizmov ribozómových komplexov.
Obrázok 01: Vektor výrazu
Expresný vektor je skonštruovaný tak, aby obsahoval regulačné sekvencie, ktoré pôsobia ako oblasti zosilňovača a promótora, čo vedie k účinnej transkripcii cudzieho génu. Významné množstvo stabilnej messengerovej RNA (mRNA) môže byť neskôr preložené do špecifických proteínov. Expresia proteínu pomocou expresného vektora môže byť prísne kontrolovaná. Proteín je produkovaný vo významných množstvách, keď je to potrebné, pomocou použitia induktora. Avšak v niektorých systémoch môže byť proteín konštitutívne exprimovaný. Obľúbeným príkladom expresného vektora je cicavčí vektor pCI.
Aké sú podobnosti medzi vektorom raketoplánu a vektorom výrazu?
- Vektor kyvadlovej dopravy a expresný vektor sú dva typy vektorov používaných v molekulárnej biológii.
- Oba typy vektorov môžu byť plazmidy.
- Tieto typy vektorov majú počiatok replikácie.
- Oba typy vektorov majú klonovacie miesta.
- Tieto vektory majú voliteľné markery (odolnosť voči antibiotikám).
Aký je rozdiel medzi vektorom raketoplánu a vektorom výrazu?
Shuttle vektor je zvyčajne plazmid, ktorý nie je určený na štúdie génovej expresie v bunkách, zatiaľ čo expresný vektor je zvyčajne plazmid alebo vírus, ktorý je určený na štúdie génovej expresie v bunkách. Toto je kľúčový rozdiel medzi kyvadlovým vektorom a expresným vektorom. Okrem toho kyvadlový vektor nepotrebuje regulačné sekvencie, ako je silný promótor, zosilňovač, induktor a prenosná translačná iniciačná sekvencia (PTIS) a silný terminátor. Na druhej strane expresný vektor potrebuje regulačné sekvencie, ako je silný promótor, zosilňovač, induktor a prenosná translačná iniciačná sekvencia (PTIS) a silný terminátor.
Nižšie uvedená infografika predstavuje rozdiely medzi kyvadlovým vektorom a expresným vektorom v tabuľkovej forme na porovnanie vedľa seba.
Zhrnutie – Shuttle Vector vs Expression Vector
Shuttle vector a expresný vektor sú dva typy vektorov používaných v molekulárnych biologických experimentoch. Kyvadlový vektor je zvyčajne plazmid, ktorý nie je určený na štúdie génovej expresie v bunkách, zatiaľ čo expresný vektor je zvyčajne plazmid alebo vírus, ktorý je určený na štúdie génovej expresie v bunkách. Toto je kľúčový rozdiel medzi kyvadlovým vektorom a expresným vektorom.