Kľúčový rozdiel – TLC vs HPTLC
TLC a HPTLC sú dve chemické techniky používané na oddelenie neprchavých zložiek v zmesi. Kľúčový rozdiel medzi TLC a HPTLC je v tom, že absorbčný materiál v TLC doske má veľké častice, zatiaľ čo HPTLC dosky majú veľmi malé častice adsorbčného materiálu.
TLC je tenkovrstvová chromatografia. HPTLC je vysokovýkonná tenkovrstvová chromatografia, ktorá je pokročilou technikou v porovnaní s metódou TLC.
Čo je TLC?
TLC alebo tenkovrstvová chromatografia je základná chemická technika používaná na oddelenie neprchavých zložiek v zmesi. Tento experiment sa vykonáva pomocou tabúľ skla, plastu alebo papiera. Táto fólia je potiahnutá tenkou vrstvou celulózy alebo silikagélu (adsorbčný materiál). Táto tenká vrstva je známa ako stacionárna fáza TLC. Hárok je známy ako doska TLC.
Pred experimentom sú základná a horná línia označené ceruzkou na TLC platni. Potom sa vzorka nanesie pozdĺž tejto čiary pomocou kapilárnej trubice. Potom sa TLC platňa umiestni vertikálne do mobilnej fázy. Mobilná fáza je rozpúšťadlo (alebo zmes rozpúšťadiel) umiestnené v nádobe. Pri umiestnení TLC doštičky do tejto mobilnej fázy by sa mala základná línia udržiavať nad okrajom rozpúšťadla. V opačnom prípade sa vzorka rozpustí v rozpúšťadle.
TLC platňa môže zostať nejaký čas v mobilnej fáze. Potom s časom mobilná fáza stúpa nahor po doske v dôsledku kapilárneho pôsobenia. Ak je vzorka rozpustná v mobilnej fáze, bude stúpať nahor spolu s mobilnou fázou.
Za touto metódou TLC stojí princíp „podobné rozpúšťa podobné“. To znamená, že polárne zlúčeniny sa rozpúšťajú v polárnych rozpúšťadlách, zatiaľ čo nepolárne zlúčeniny sa rozpúšťajú v nepolárnych rozpúšťadlách. Stacionárna fáza je zvyčajne silikagél alebo celulóza, čo je polárna zlúčenina. Použitou mobilnou fázou je nepolárne rozpúšťadlo, ako je hexán. Preto, ak vzorka obsahuje nejaké nepolárne zložky, tieto zložky budú migrovať nahor spolu s mobilnou fázou. Polárne komponenty sa prilepia na platňu. Medzi pohyblivými komponentmi budú stredne nepolárne zlúčeniny migrovať pomaly, zatiaľ čo vysoko nepolárne zlúčeniny budú migrovať rýchlo. Keď čelo rozpúšťadla dosiahne hornú líniu TLC platne, platňa sa vyberie a nechá sa vysušiť.
Obrázok 01: Technika TLC
Ak zložky vo vzorke boli farebné zlúčeniny, na platni by mali byť farebné škvrny na rôznych miestach. Ale ak sú zložky bezfarebné, mali by sa použiť iné techniky; napríklad rozprašovanie ninhydrínu na detekciu amoniaku alebo amínov (primárnych amínov a sekundárnych amínov).
Čo je HPTLC?
HPTLC alebo vysokoúčinná tenkovrstvová chromatografia je pokročilá forma tenkovrstvovej chromatografie (TLC). Rozlíšenie a presnosť HPTLC sú veľmi vysoké. Väčšinu krokov tejto techniky možno automatizovať.
Platničky používané pri HPTLC obsahujú častice silikagélu s veľmi malou veľkosťou a hustota gélu na platni je vysoká. Povrch dosky je hladký a poskytuje efektívne oddelenie. Analýza je rýchlejšia ako technika TLC. Citlivosť tejto metódy je tiež vysoká. V HPTLC je možné oddeliť niekoľko rôznych vzoriek na tej istej platni bez akéhokoľvek kroku prípravy vzorky.
Aký je rozdiel medzi TLC a HPTLC?
TLC vs HPTLC |
|
| TLC je tenkovrstvová chromatografia. | HPTLC je vysokoúčinná tenkovrstvová chromatografia. |
| Technika | |
| Je to základná chemická technika používaná na oddelenie neprchavých zložiek v zmesi. | Je to pokročilá forma tenkovrstvovej chromatografie (TLC). |
| Plate | |
| TLC platňa môže byť vyrobená z papiera, plastu alebo skla, na ktoré je nanesený adsorbčný materiál s veľkými časticami. | HPTLC doštičky majú veľmi malé častice adsorbčného materiálu. |
| Rozlíšenie | |
| Metóda TLC poskytuje slabé rozlíšenie, keď vzorka obsahuje zložky s podobnými vlastnosťami. | Metóda HPTLC poskytuje vysoké rozlíšenie. |
| Čas | |
| Technika TLC je časovo náročná technika. | HPTLC poskytuje výsledky vyššou rýchlosťou ako metóda TLC. |
Zhrnutie – TLC vs HPTLC
HPTLC je pokročilá forma TLC. Kľúčový rozdiel medzi TLC a HPTLC je v tom, že doska TLC môže byť vyrobená z papiera, plastu alebo skla, na ktoré sa nanáša adsorbčný materiál s veľkými časticami, zatiaľ čo doštičky HPTLC majú veľmi malé častice adsorbčného materiálu.
