Kľúčový rozdiel – DMEM vs EMEM
Kultivácia živočíšnych buniek sa vykonáva na udržiavanie línií živočíšnych buniek, aby sa mohli vykonávať mnohé výskumné aktivity. Živočíšne bunkové línie sa udržiavajú v sterilných podmienkach a vyžadujú špeciálne techniky. Používajú sa v štúdiách týkajúcich sa výroby vakcín, na identifikáciu správania bunky voči karcinogénom a mutagénom a pri výskume rakoviny. Bunkové kultivačné médiá sú veľmi dôležité pre úspech kultivácie živočíšnych buniek. Existujú rôzne typy bunkových kultivačných médií, ako napríklad Dulbeccovo modifikované Eagle médium (DMEM) a Eagleovo minimálne základné médium (EMEM). DMEM je modifikované základné médium so zvýšenými koncentráciami aminokyselín a vitamínov až štvornásobne. To zahŕňa aj niektoré ďalšie substitúcie, ktoré zvyšujú nutričné podmienky média. EMEM je jedným z prvých typov kultivačných médií živočíšnych buniek, ktoré vyvinul Harry Eagle. Je to jednoduché, základné médium s minimálnymi množstvami živín. Kľúčovým rozdielom medzi dvoma médiami je zloženie živín. EMEM sa skladá z minimálnych koncentrácií živín potrebných na rast kultúry, zatiaľ čo DMEM je veľmi komplexné médium so zvýšenými koncentráciami aminokyselín a vitamínov.
Čo je DMEM?
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) je modifikovaný typ média, ktorý sa komerčne pripravuje ako krémovo biely prášok. Toto je upravené z EMEM a zloženie živín je upravené zvýšením koncentrácie aminokyselín a vitamínov. Koncentrácia aminokyselín je v porovnaní s bazálnym médiom zvýšená až dvojnásobne. Koncentrácia vitamínov sa zvýši až štvornásobne, čím sa zvýši obsah živín v médiu.
DMEM je tiež modifikovaný pridaním ďalších solí, ako je dusičnan železitý, pyruvát sodný a niektoré neesenciálne aminokyseliny, ako je serín a glycín. Koncentrácia glukózy v médiu je tiež zmenená. Pôvodná formulácia pozostáva z 1000 mg/l glukózy, zatiaľ čo v DMEM je koncentrácia zvýšená až na 4500 mg/l. DMEM tiež vyžaduje doplnenie sérového média, pretože to nie je kompletné médium. Najčastejšie sa DMEM dopĺňa fetálnym bovinným sérom (FBS). FBS poskytuje potrebné proteíny a rastové faktory pre proces kultivácie.
Hodnota pH média sa mení po pridaní hydrogénuhličitanu sodného. pH média pred pridaním hydrogenuhličitanu sodného je okolo 6,80 – 7,40, zatiaľ čo pH po pridaní hydrogenuhličitanu sodného je v rozsahu 7,60 – 8,20. Skladovacia teplota média je 2 – 8 0C.
Obrázok 01: DMEM
Aplikácie DMEM
- Študovať schopnosť polyomavírusu vytvárať plaky v myších embryonálnych bunkách.
- V štúdiách kontaktnej inhibície
- V kuracích bunkových kultúrach
Čo je EMEM?
Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) je jedným z prvých vyvinutých médií pri kultivácii živočíšnych bunkových línií. Prvé typy živočíšnych bunkových línií pestovaných pomocou EMEM zahŕňajú myšie L bunky a HeLa bunky. Médium EMEM je tiež typ modifikovaného média. Harry Eagle najprv sformuloval médium EMEM. Médium EMEM obsahovalo esenciálne aminokyseliny a vitamíny v minimálnej koncentrácii vyžadovanej typmi buniek. Vo formulácii neboli zahrnuté neesenciálne aminokyseliny a koncentrácie glukózy a hydrogénuhličitanu sodného sú znížené. Hoci médium obsahovalo vyvážené množstvo minimálnych rastových požiadaviek na úspešný rast buniek.
EMEM nie je úplné médium. Preto je pre úspešný rast cicavčích buniek potrebná suplementácia sérom. EMEM sa používa na širokej škále buniek a je stále populárnym médiom medzi výskumníkmi bunkových kultúr.
Aké sú podobnosti medzi DMEM a EMEM?
- V kultúre živočíšnych buniek sa používajú oba typy médií.
- Oba typy médií sú tekuté prípravky.
- Oba typy médií sú upravené médiá zo základného média.
- Oba typy médií obsahujú esenciálne aminokyseliny, vitamíny a anorganické soli, ktoré sú potrebné pre rast.
- Oba typy médií sú neúplné. Preto by sa malo pridať sérum.
- Oba typy médií používajú glukózu ako zdroj uhlíka.
- Oba typy médií majú vyššie pH a upravujú sa pridaním hydrogénuhličitanu sodného.
Aký je rozdiel medzi DMEM a EMEM?
DMEM vs EMEM |
|
| DMEM je upravený typ základného média so zvýšenými koncentráciami aminokyselín a vitamínov. To zahŕňa aj niektoré ďalšie substitúcie, ktoré zvyšujú nutričné podmienky média. | EMEM je jedným z prvých typov kultivačných médií živočíšnych buniek, ktoré vyvinul Harry Eagle. Je to jednoduché, základné médium s minimálnym množstvom živín. |
| Modifikácie aminokyselín | |
| Koncentrácia aminokyselín sa v médiu DMEM zvýšila až dvojnásobne. | V EMEM sa používa minimálna koncentrácia aminokyselín. |
| Úpravy vitamínov | |
| Koncentrácia vitamínov sa v DMEM zvýšila až štvornásobne. | V EMEM sa používa minimálna koncentrácia vitamínov. |
| Koncentrácia glukózy | |
| Koncentrácia glukózy sa v DMEM zvýšila až na 4500 mg/l. | Koncentrácia glukózy je 1000 mg/l v EMEM. |
| Prítomnosť neesenciálnych aminokyselín | |
| Súčasné v DMEM. | Neprítomný v EMEM. |
| Prítomnosť ďalších komponentov | |
| V DMEM sú prítomné zložky ako dusičnan železitý, pyruvát sodný. | EMEM obsahuje minimálne množstvo živín. |
Zhrnutie – DMEM vs EMEM
DMEM a EMEM sú dve populárne kultivačné médiá živočíšnych buniek, ktoré sa líšia hlavne zložením živín. DMEM je modifikovaná forma EMEM, kde sa koncentrácie živín zvyšujú spolu s pridaním niektorých nových zložiek. EMEM je minimálne médium a obsahuje všetky základné faktory potrebné pre úspešný rast živočíšnych bunkových línií. Tieto médiá by sa mali používať za vysoko sterilných podmienok a obe médiá by sa mali pred použitím doplniť sérom. Toto je rozdiel medzi DMEM a EMEM.
Stiahnite si PDF DMEM vs EMEM
Verziu tohto článku si môžete stiahnuť vo formáte PDF a použiť ju na offline účely podľa citácie. Stiahnite si PDF verziu tu Rozdiel medzi DMEM a EMEM
