Kľúčový rozdiel medzi progresívnym a regresívnym farbením je v tom, že pri progresívnom farbení je tkanivo ponechané v roztoku na farbenie len tak dlho, aby sa dosiahol požadovaný koncový bod, zatiaľ čo pri regresívnom farbení je tkanivo zámerne ponechané na nadmerné farbenie, kým farbivo nasýti všetky tkanivové prvky a potom odfarbí.
Sfarbenie je technika, ktorá zvýrazňuje a rozlišuje zložky tkaniva a umožňuje ich pozorovanie pod mikroskopom. Farbenie H a E je všeobecný postup farbenia tkaniva, ktorý sa najčastejšie používa v histológii. Používa hematoxylín a eozín (kontrafarbivo). Jadrové farbenie pomocou hematoxylínu sa môže uskutočniť progresívnymi alebo regresívnymi technikami farbenia. Niektoré hematoxylínové formulácie sa používajú pri progresívnom farbení. Mayerov hematoxylín je jedným z príkladov. Progresívne škvrny majú nízku koncentráciu hematoxylínu. Preto pomaly a selektívne farbia chromatín. Niektoré ďalšie formulácie sa používajú pri regresnom farbení. Harris hematoxylín sa používa pri regresnom farbení. Regresívne škvrny majú vysokú koncentráciu hematoxylínu; preto škvrna rýchlo difunduje cez celú bunku.
Čo je progresívne farbenie?
Progresívne farbenie je technika, ktorá umožňuje tkanivu v roztoku na farbenie len tak dlho, aby dosiahol požadovaný koncový bod. Na určenie dokončenia farbenia je preto potrebné časté sledovanie kvality farbenia. Intenzita farbenia je riadená časom ponorenia.
Obrázok 01: Štruktúra hematoxylínu
Gillov hematoxylín a Mayerov hematoxylín majú progresívny charakter. Pre tieto dva hematoxylingy sa pri progresívnom farbení bežne používa čas farbenia 5-10 minút. Vo všeobecnosti sú progresívne hematoxylíny menej koncentrované. Preto pomaly a selektívne farbia chromatín. Pri progresívnom farbení hematoxylín primárne farbí chromatín na požadovanú intenzitu. Na odstránenie prebytočnej škvrny teda nie je potrebná diferenciácia v zriedenom kyslom alkohole.
Čo je regresívne farbenie?
Regresívne farbenie je rýchlejšia technika farbenia, pri ktorej sa tkanivo zámerne prefarbuje, kým farbivo nenasýti všetky zložky tkaniva. Potom sa tkanivo selektívne odfarbí, kým nedosiahne správny koncový bod. Krok odfarbenia sa nazýva diferenciácia. Diferenciácia sa vykonáva na odstránenie prebytočných škvŕn. Zvyčajne sa to robí pomocou zriedeného kyslého alkoholu.
Obrázok 02: Farbenie H a E
Harrisov hematoxylín je populárny typ hematoxylínu. Ehrlichove a Delafieldove hematoxylíny sa tiež používajú pri regresívnom farbení. Regresívne škvrny majú vysokú koncentráciu hematoxylínu. Preto rýchlo difundujú celú bunku a nadmerne farbia chromatín a cytoplazmu. Regresívne farbenie sa uprednostňuje, keď sa vyžaduje veľmi jasná diferenciácia tkanivových prvkov.
Aké sú podobnosti medzi progresívnym a regresívnym farbením?
- Progresívne a regresívne farbenie sú dva typy techník farbenia.
- Obe používajú farbivo nazývané hematoxylín.
Aký je rozdiel medzi progresívnym a regresívnym farbením?
Progresívne farbenie je pomalší proces farbenia, pri ktorom je tkanivo ponechané v roztoku na farbenie len tak dlho, aby sa dosiahol požadovaný koncový bod. Na rozdiel od toho, regresívne farbenie je rýchlejší proces farbenia, pri ktorom je tkanivo zámerne prefarbené a potom odfarbené. Toto je kľúčový rozdiel medzi progresívnym a regresívnym farbením.
Ďalším významným rozdielom medzi progresívnym a regresívnym farbením je navyše to, že progresívne farbenie nevyžaduje ďalší krok nazývaný diferenciácia, zatiaľ čo regresívne farbenie vyžaduje diferenciáciu, aby sa odstránili prebytočné škvrny. Okrem toho progresívne škvrny majú nízku koncentráciu hematoxylínov, zatiaľ čo regresívne škvrny majú vyššiu koncentráciu hematoxylínov.
Nasledujúca infografika uvádza ďalšie rozdiely medzi progresívnym a regresívnym farbením.
Súhrn – progresívne vs. regresívne farbenie
Progresívne farbenie je pomalá technika farbenia, pri ktorej je tkanivo ponechané v roztoku na farbenie len tak dlho, aby sa dosiahol konečný bod. Preto sa nadmerné farbenie nerobí, je progresívne farbenie. Na rozdiel od toho, regresívne farbenie je rýchlejšia technika farbenia, pri ktorej sa tkanivo nadmerne zafarbí a potom sa odfarbí. Progresívne farbenie nevyžaduje diferenciáciu (odstránenie prebytočnej škvrny), zatiaľ čo regresívne farbenie vyžaduje diferenciáciu v zriedenom kyslom alkohole, aby sa odstránila prebytočná škvrna. Progresívne škvrny majú vo všeobecnosti nízku koncentráciu hematoxylínov, zatiaľ čo regresívne škvrny majú vyššiu koncentráciu hematoxylínov. Toto sumarizuje rozdiel medzi progresívnym a regresívnym farbením.