Kľúčový rozdiel – očkovanie verzus inkubácia
Mikroorganizmy sa kultivujú v laboratóriách a priemysle na rôzne účely, ako je charakterizácia, diferenciácia, identifikácia, vývoj antibiotík, vývoj vakcín, produkcia transgénnych (GMO) rastlín a zvierat a extrakcia organických kyselín. Pestujú sa v umelo syntetizovaných pestovateľských substrátoch alebo v prírodných substrátoch. Preto by sa mali pripraviť rôzne typy sterilných čerstvých médií a požadované mikroorganizmy sa kultivujú v čistých alebo zmiešaných kultúrach. Médiá sú doplnené všetkými živinami potrebnými pre rast mikroorganizmu. Účinok zavedenia mikroorganizmu do čerstvého média alebo substrátu je známy ako očkovanie. Na dosiahnutie dostatočného rastu mikroorganizmu by však mali byť poskytnuté optimálne rastové podmienky. Proces poskytovania požadovaných rastových podmienok, ako je teplota, vlhkosť a pH a umožnenie rastu mikroorganizmov na médiu, je známy ako inkubácia. Kľúčový rozdiel medzi očkovaním a inkubáciou je teda v tom, že očkovanie je zavedenie mikroorganizmov do pestovateľských médií alebo substrátov, zatiaľ čo inkubácia umožňuje mikroorganizmom rásť za poskytnutých rastových podmienok.
Čo je očkovanie?
Inokulácia je proces zavádzania mikroorganizmov do pestovateľského média, ktoré je vhodné na ich rast. Inými slovami, inokulácia môže byť definovaná ako proces, ktorý zavádza patogénny alebo antigénny mikroorganizmus do živého organizmu s cieľom stimulovať produkciu protilátok. Keď je očkovanie ukončené, mikroorganizmy začnú rásť a množiť sa v médiu vytváraním viditeľných kolónií.
V mikrobiológii sa používajú rôzne typy inokulačných nástrojov a techník. Očkovacia slučka, očkovacia ihla, vatové tampóny, kliešte, sklenené dávkovače, dávkovacie pipety sú bežne používané inokulačné nástroje v laboratóriách. Všetky tieto materiály by mali byť bez nečistôt. Preto je potrebné ich pred naočkovaním sterilizovať vhodnou sterilizačnou technikou, aby sa zabránilo kontaminácii alebo rastu nežiaducich mikroorganizmov v kultivačnom médiu. Metóda roztieracej platne, metóda roztieracieho miesta, metóda nalievacej platne, bodové očkovanie, bodnutá kultúra, šikmá kultúra je niekoľko očkovacích techník používaných v mikrobiálnych laboratóriách na pestovanie baktérií a húb.
Obrázok 01: Inokulácia baktérie pomocou techniky pásovej platne
Čo je inkubácia?
Mikroorganizmy majú rôzne nároky na rast. Mali by byť zásobované potrebnými živinami, vodou, minerálmi, rastovými faktormi, stopovými prvkami a ďalšími rastovými podmienkami. Po naočkovaní mikróbu do čerstvého média by sa mali udržiavať podmienky rastu, aby sa podporil rast mikroorganizmu. Proces umožnenia rastu mikroorganizmov v médiu poskytnutím nevyhnutných rastových podmienok je známy ako inkubácia. Naočkované kultivačné platne môžu byť umiestnené vo vnútri zariadenia nazývaného inkubátor na inkubáciu. Inkubátory sú navrhnuté tak, aby operátor mohol kontrolovať teplotu, vlhkosť, koncentrácie plynov atď. podľa požiadaviek mikróbov.
Aké sú fázy mikrobiálneho rastu?
Ak sú zabezpečené optimálne podmienky, mikroorganizmy majú tendenciu rásť, rozmnožovať sa a množiť sa využitím dostupných živín v médiu. Mikrobiálny rast má v kultivačnom médiu štyri odlišné fázy. Po inokulácii iniciujú fázu oneskorenia. Počas fázy lag nevykazujú mikróby rýchly rast ani množenie. Začínajú sa prispôsobovať novému prostrediu a stabilizujú sa tam. Po ich úprave sa spustí druhá fáza, ktorá ukazuje exponenciálny rast mikroorganizmu. Druhá fáza je známa ako log fáza alebo exponenciálna fáza. Počas log fázy mikróby vykazujú optimálnu rýchlosť rastu a množenie. Tretia fáza začína po log fáze, keď sú živiny a iné požiadavky v médiu obmedzené. Počas stacionárnej fázy sa rýchlosť rastu a odumierania vyrovná a krivka rastu je v priamke rovnobežnej s osou x. Štvrtá fáza je fáza smrti, kde miera úmrtnosti prevyšuje rýchlosť rastu. Po niekoľkých dňoch sa mikrobiálny rast zastaví a zanechá za sebou mŕtvu kultúru.
Obrázok 02: Inkubátor mikrobiálnych doštičiek
Aký je rozdiel medzi očkovaním a inkubáciou?
Inokulácia vs inkubácia |
|
| Inokulácia je proces zavádzania mikroorganizmov alebo suspenzie mikroorganizmov do kultivačného média. | Inkubácia je proces umožňujúci naočkovaným mikroorganizmom rásť za požadovaných podmienok rastu. |
| Používané nástroje | |
| Očkovanie je možné vykonať pomocou očkovacích ihiel, očkovacích slučiek, vatových tampónov, pipiet atď. | Inkubáciu je možné vykonať v kultúrnej miestnosti, inkubátore, kultivačných stojanoch atď. |
| Čas | |
| Očkovanie sa vykoná v krátkom čase. | Inkubácia trvá niekoľko hodín až dní. |
| Udržiavané podmienky | |
| Očkovanie sa vykonáva za aseptických podmienok vo vnútri laminárnej vzduchovej komory. | Inkubácia sa vykonáva poskytnutím vhodných rastových podmienok, ako je teplota, vlhkosť, koncentrácia kyslíka, svetlo atď. |
Zhrnutie – Inokulácia verzus inkubácia
Inokulácia a inkubácia sú dva hlavné kroky pri kultivácii mikroorganizmov v laboratóriách. Inokulácia je činnosť zavedenia mikroorganizmu do vhodného kultivačného média alebo substrátu. Naočkované médiá majú vhodné podmienky na rast a množenie. Tento proces je známy ako inkubácia. Toto je hlavný rozdiel medzi očkovaním a inkubáciou. V mikrobiálnych laboratóriách existujú špeciálne nástroje a vybavenie na účely inkubácie. Inkubátor je zariadenie, ktoré umožňuje mikroorganizmom rásť pri kontrolovanej teplote, prevzdušňovaní, vlhkosti atď. Inokulácia a inkubácia by sa mala vykonávať za správnych aseptických podmienok, aby sa predišlo kontaminácii a strate času.
Stiahnuť PDF verziu očkovania vs inkubácia
Môžete si stiahnuť PDF verziu tohto článku a použiť ju na offline účely podľa citácií. Stiahnite si PDF verziu tu Rozdiel medzi očkovaním a inkubáciou.
