Kľúčový rozdiel medzi pBR322 a pUC19 je v tom, že pBR322 je plazmidový vektor s dĺžkou 4361 párov báz, zatiaľ čo pUC19 je plazmidový vektor s dĺžkou 2686 párov báz.
Klonovací vektor je malý kúsok DNA, ktorý môže byť stabilne udržiavaný v organizme. Je to tiež malý kúsok DNA, do ktorého je možné vložiť cudzí fragment DNA na účely klonovania. Vektor obsahuje dôležité znaky, ktoré umožňujú pohodlnú inzerciu cudzieho fragmentu DNA do vektorov, ako sú reštrikčné miesta, selektovateľný marker, reportérový gén a prvok expresie. Klonovanie sa prvýkrát uskutočnilo pomocou E.coli. Klonovacie vektory pre E. coli zahŕňajú plazmidy, bakteriofágy, kozmidy a bakteriálne umelé chromozómy (BAC). Najčastejšie používané vektory sú geneticky upravené plazmidy. pBR322 a pUC19 sú dva typy plazmidových vektorov.
Čo je pBR322?
pBR322 je plazmidový vektor. Je to jeden z prvých široko používaných klonovacích vektorov pre E. coli. Tento vektor bol prvýkrát vytvorený v roku 1977 v laboratóriu Herberta Boyera na Kalifornskej univerzite v San Franciscu. Je to kruhová dvojvláknová DNA s dĺžkou 4361 párov báz.
Obrázok 01: pBR322
Tento plazmidový vektor má špeciálne vlastnosti. Normálne má dva gény rezistencie na antibiotiká: gén bla kódujúci proteín rezistencie na ampicilín (AmpR) a gén tetA kódujúci rezistenciu na tetracyklín (TetR) proteín. Okrem toho obsahuje počiatok replikácie pMB1. Tento plazmidový vektor má tiež gén rop, ktorý kóduje obmedzovač počtu kópií plazmidu. Okrem toho má tento vektor jedinečné reštrikčné miesta pre viac ako 40 reštrikčných enzýmov. Jedenásť z týchto štyridsiatich reštrikčných miest leží v géne TetR . V rámci promótora génu TetR sú dve reštrikčné miesta pre reštrikčné enzýmy HindIII a Clal. Okrem toho existuje šesť veľmi dôležitých reštrikčných miest v géne AmpR. pBR322 je klonovací vektor s nízkym počtom kópií. Poskytuje približne 20 kópií plazmidov na bakteriálnu bunku. Molekulová hmotnosť vektora je 2,83×106 d altonov.
Čo je pUC19?
pUC19 je plazmidový vektor, ktorý má dĺžku 2686 párov báz. Je to jeden zo série plazmidových vektorov vytvorených Joachimom Messingom a spolupracovníkmi. Prvé práce na tejto sérii plazmidov sa uskutočnili na Kalifornskej univerzite. Je to kruhová dvojvláknová DNA.
Obrázok 02: pUC19
Tento plazmidový vektor tiež obsahuje dôležité vlastnosti. Má N-koncový fragment génu β-glaktozidázy (lacz). Má tiež oblasť viacerých klonovacích miest (MCS). Táto oblasť je rozdelená na kodóny 6 a 7 génu lacz. Oblasť MCS poskytuje veľa restrikčných miest pre reštrikčné endonukleázy. Okrem génu β-glaktozidázy kóduje pUC19 aj gén rezistencie na ampicilín (AmpR). Okrem toho je počiatok replikácie odvodený z plazmidu pMB1. Hoci pUC19 má malú veľkosť, má vysoký počet kópií (500-700 kópií na bakteriálnu bunku). Molekulová hmotnosť tohto plazmidového vektora je 1,75×106 d altonov.
Aké sú podobnosti medzi pBR322 a pUC19?
- pBR322 a pUC19 sú dva typy plazmidových vektorov.
- Sú to populárne klonovacie vektory pre coli.
- Oba plazmidové vektory majú rovnaký začiatok replikácie plazmidu pMB1.
- Tieto vektory majú viacero reštrikčných miest.
- Oba plazmidové vektory majú ako voliteľný marker gén rezistencie na ampicilín.
Aký je rozdiel medzi pBR322 a pUC19?
pBR322 je plazmidový vektor s dĺžkou 4361 párov báz, zatiaľ čo pUC19 je plazmidový vektor s dĺžkou 2686 párov báz. Toto je kľúčový rozdiel medzi pBR322 a pUC19. Okrem toho pBR322 je plazmidový vektor s nízkym počtom kópií, zatiaľ čo pUC19 je plazmidový vektor s vysokým počtom kópií.
Nižšie uvedená infografika predstavuje rozdiely medzi pBR322 a pUC19 v tabuľkovej forme na porovnanie vedľa seba.
Zhrnutie – pBR322 vs pUC19
Najbežnejšie používané klonovacie vektory pre E.coli sú geneticky upravené plazmidy.pBR322 a pUC19 sú dva typy plazmidových vektorov. pBR322 je plazmidový vektor s dĺžkou 4361 párov báz, zatiaľ čo pUC19 je plazmidový vektor s dĺžkou 2686 párov báz. Toto je kľúčový rozdiel medzi pBR322 a pUC19.
