Kľúčový rozdiel medzi iónomeničovou a rozmerovo vylučovacou chromatografiou je v tom, že iónomeničová chromatografia sa používa na analýzu iónových látok podľa náboja, zatiaľ čo vylučovacia chromatografia sa používa na analýzu veľkých molekúl podľa veľkosti.
Chromatografia je analytická technika, ktorú možno použiť na analýzu rôznych zmesí. Chromatografické techniky sú pomenované podľa parametra použitého na analýzu látok – napr. veľkostne vylučovacia chromatografia, iónomeničová chromatografia atď.
Čo je to ionexová chromatografia?
Iónová výmenná chromatografia je analytická technika, pri ktorej môžeme analyzovať iónové látky. Často je užitočné analyzovať anorganické anióny a katióny (t. j. chloridové a dusičnanové anióny a katióny draslíka a sodíka). Hoci to nie je veľmi bežná metóda, môžeme pomocou nej analyzovať organické ióny. Okrem toho môžeme túto techniku použiť na čistenie proteínov, pretože proteíny sú nabité molekuly pri určitých hodnotách pH. Tu používame pevnú stacionárnu fázu, ku ktorej sa môžu pripojiť nabité častice. Ako pevný nosič môžeme napríklad použiť kopolyméry živice polystyrén-divinylbenzén.
Obrázok 01: Teória ionexovej chromatografie
Na ďalšie vysvetlenie, stacionárna fáza má fixné ióny, ako sú síranové anióny alebo kvartérne amínové katióny. Každý z nich by sa mal spojiť s protiiónom (ión s opačným nábojom), ak chceme zachovať neutralitu tohto systému. Ak je protiiónom katión, potom systém pomenujeme ako katexovú živicu. Ale ak je protiiónom anión, systém je aniónomeničová živica. Okrem toho existuje päť hlavných krokov v iónovo-výmennej chromatografii:
- Počiatočná fáza
- Adsorpcia cieľa
- Začiatok elúcie
- Koniec elúcie
- Regenerácia
Čo je to vylučovacia chromatografia?
Vylučovacia chromatografia alebo SEC je analytická technika, pri ktorej možno molekuly v zmesi oddeliť podľa ich veľkosti a molekulovej hmotnosti. Zvyčajne pracuje s veľkými molekulami nazývanými makromolekuly. Typicky sa na analýzu používa vodný roztok. Potom sa to nazýva gélová filtračná chromatografia. Ak ide o organické rozpúšťadlo, nazýva sa to gélová permeačná chromatografia.
Gélová filtračná chromatografia je forma vylučovacej chromatografie, pri ktorej ako mobilnú fázu používame vodný roztok. Preto mobilnou fázou, ktorú často používame pri tejto technike, je vodný pufor. Na túto separáciu používame aj chromatografickú kolónu a kolónu potrebujeme naplniť poréznymi guľôčkami. Zvyčajne sú ako porézne materiály užitočné Sephadex a agaróza. Preto sú tieto materiály stacionárnou fázou nášho experimentu. Okrem toho môžeme použiť veľkosť pórov týchto guľôčok na určenie veľkosti makromolekúl, ktoré oddeľujeme. Je to však len odhad.
Obrázok 02: Prístroj na vylučovaciu chromatografiu
Gélová permeačná chromatografia je forma vylučovacej chromatografie, pri ktorej ako mobilnú fázu používame organické rozpúšťadlo. Preto na tento účel môžeme použiť roztoky ako hexán a toluén. Stacionárna fáza je porézny materiál, rovnaký ako pri gélovej filtračnej chromatografii. Táto technika sa často používa na polyméry a iné organicky rozpustné materiály. Metóda pôsobenia tejto techniky je podobná ako pri gélovej filtračnej chromatografii.
Aký je rozdiel medzi iónovou výmenou a vylučovacou chromatografiou?
Chromatografia je analytická technika, ktorú možno použiť na analýzu rôznych zmesí. Kľúčový rozdiel medzi iónomeničovou a rozmerovo vylučovacou chromatografiou je v tom, že iónomeničová chromatografia sa používa na analýzu iónových látok podľa náboja, zatiaľ čo vylučovacia chromatografia sa používa na analýzu veľkých molekúl podľa veľkosti.
Informačná grafika nižšie poskytuje viac informácií o rozdieloch medzi iónovou výmenou a chromatografiou s vylučovacou veľkosťou.
Zhrnutie – iónová výmenná vs. veľkostne vylučujúca chromatografia
Chromatografia je analytická technika, ktorú možno použiť na analýzu rôznych zmesí. Kľúčový rozdiel medzi iónomeničovou a rozmerovo vylučovacou chromatografiou je v tom, že iónomeničová chromatografia sa používa na analýzu iónových látok podľa náboja, zatiaľ čo vylučovacia chromatografia sa používa na analýzu veľkých molekúl podľa veľkosti.
