Kľúčový rozdiel medzi HEK293 a HEK293t je v tom, že HEK293 je imortalizovaná bunková línia odvodená z embryonálnej ľudskej obličky, ktorá je transfekovaná strihaným ľudským adenovírusom typu 5DNA, zatiaľ čo HEK293t je dcérska bunková línia odvodená z pôvodnej bunkovej línie HEK293, ktorá je transfekované plazmidovým vektorom nesúcim počiatok replikácie SV40.
Transfekcia je zvyčajne definovaná ako proces zavádzania cudzej DNA a RNA do buniek s cieľom ovplyvniť ich genotyp a fenotyp. Takéto zavedenie cudzích nukleových kyselín rôznymi biologickými, chemickými a fyzikálnymi metódami môže zmeniť vlastnosti bunky. V konečnom dôsledku to umožňuje štúdium funkcie génu a expresie proteínov v kontexte bunky. HEK293 a HEK293t sú dve bunkové línie, ktoré sa už mnoho rokov vo veľkej miere využívajú vo výskume bunkovej biológie kvôli ich sklonu k transfekcii.
Čo je HEK293?
HEK293 je imortalizovaná bunková línia odvodená z embryonálnej ľudskej obličky, ktorá je transfekovaná strihaným ľudským adenovírusom typu 5DNA, aby sa vytvorilo množstvo rekombinantných proteínov. HEK293 boli pôvodne izolované z ľudských obličkových buniek holandským biológom Alexom Van der Ebom v roku 1973. Tieto bunky boli pestované v tkanivovej kultúre ženského plodu. Neskôr ich transfekoval strihaný ľudský adenovírus typu 5DNA Frank Graham, postdoktorand vo Van der Ebovom laboratóriu. Táto bunková línia dostala názov HEK293, pretože to bol Frankov experiment 293rd.
Obrázok 01: HEK293
Inkorporácia adenovírusových génov do bunkového genómu HEK umožňuje týmto bunkám veľmi efektívne produkovať veľké množstvo rekombinantných proteínov. Okrem toho adenovírusový vektor obsahuje oblasť promótora CMV; preto túto účinnosť ďalej zvyšuje. Táto bunková línia bola použitá ako hostiteľ pre štúdie génovej expresie. Túto bunkovú líniu využíva aj biotechnologický priemysel na výrobu terapeutických proteínov pre génovú terapiu.
Čo je 293 HEK?
HEK293t je dcérska bunková línia odvodená od pôvodnej bunkovej línie HEK293, ktorá je transfekovaná plazmidovým vektorom nesúcim počiatok replikácie SV40 na produkciu vysokého množstva rekombinantných proteínov. HEK293t je ľudská bunková línia, ktorá exprimuje mutantnú verziu SV40 veľkého T antigénu. HEK293t bol vytvorený v laboratóriu Michele Carlos v Stanforde prostredníctvom stabilnej transfekcie bunkovej línie HEK29E plazmidom kódujúcim mutant veľkého T antigénu SV40 citlivého na teplotu. Pôvodne sa označoval ako 293/tsA1609neo. Je to preto, že transfekcia použitá na vytvorenie bunkovej línie, ktorá prepožičiava rezistenciu na neomycín a expresiu alely tsA 1609 veľkého T antigénu SV40.
Obrázok 02: HEK293t
Vzhľadom na expresiu mutantnej verzie veľkého T antigénu SV40 môžu transfekované plazmidy s počiatkom replikácie SV 40 výrazne zvýšiť množstvo rekombinantného proteínu. Táto bunková línia sa bežne používa v biotechnologickom priemysle na expresiu proteínov a produkciu rekombinantných retrovírusov.
Aké sú podobnosti medzi HEK293 a HEK293t?
- HEK293 a HEK293t sú dve bunkové línie, ktoré sa vo veľkej miere využívajú vo výskume bunkovej biológie kvôli ich sklonu k transfekcii.
- Obe bunkové línie sú laboratórne získané.
- Tieto bunkové línie môžu výrazne zvýšiť množstvo produkcie rekombinantných proteínov.
- Vyrábajú sa transfekciou embryonálnych ľudských obličkových buniek plazmidovým vektorom.
Aký je rozdiel medzi HEK293 a HEK293t?
HEK293 je imortalizovaná bunková línia odvodená z embryonálnej ľudskej obličky, ktorá je transfekovaná strihaným ľudským adenovírusom typu 5DNA. Na rozdiel od toho, HEK293t je dcérska bunková línia odvodená od pôvodnej bunkovej línie HEK293, ktorá je transfekovaná plazmidovým vektorom nesúcim počiatok replikácie SV40. Toto je kľúčový rozdiel medzi HEK293 a HEK293t. Okrem toho HEK293 neexprimuje mutantnú verziu veľkého T antigénu SV40. Na druhej strane, HEK293t exprimuje mutantnú verziu SV40 veľkého T antigénu.
Nasledujúca infografika uvádza rozdiely medzi HEK293 a HEK293t v tabuľkovej forme na porovnanie vedľa seba.
Zhrnutie – HEK293 vs. HEK293t
HEK293 a HEK293t sú dve bunkové línie, ktoré sa vo veľkej miere používajú vo výskume bunkovej biológie kvôli ich stabilnému rastu a sklonu k transfekcii. HEK293 je imortalizovaná bunková línia odvodená z embryonálnej ľudskej obličky, ktorá je transfekovaná strihaným ľudským adenovírusom typu 5DNA, zatiaľ čo HEK293t je dcérska bunková línia odvodená z pôvodnej bunkovej línie HEK293, ktorá je transfekovaná plazmidovým vektorom nesúcim začiatok replikácie SV40. Toto sumarizuje rozdiel medzi HEK293 a HEK293t.
