Kľúčový rozdiel medzi rádioimunotestom a imunorádiometrickým testom je v tom, že pri rádioimunoteste sa vzorka alebo zlúčenina, ktorá sa má merať, pred kombináciou kombinuje s rádioaktívnym antigénom, zatiaľ čo pri imunorádiometrickom teste sa vzorka alebo zlúčenina okamžite spojí s rádioaktívne označeným protilátky.
Imunoanalýza je biochemický test, ktorý zisťuje prítomnosť alebo koncentráciu makromolekúl v roztoku pomocou protilátky alebo antigénu. Na meranie antigénov vo vzorke sa používajú fluorescenčné a rádioaktívne protilátky. Spočiatku sa protilátky používali v precipitačných technikách, ako je imunoprecipitácia, imunodifúzia a imunitná elektroforéza na analýzu sérových proteínov. V súčasnosti sa na meranie liečiv, nádorových markerov a hormónov používajú vysoko citlivé techniky, ako je rádioimunoanalýza a imunorádiometrická analýza.
Čo je rádioimunoanalýza?
Rádioimunoanalýza (RIA) je imunoanalýza, ktorá využíva rádioaktívne prvky postupnú tvorbu komplexov antigén-protilátka. RIA zvyčajne používa rádioaktívne protilátky na detekciu množstva antigénu vo vzorke. RIA je veľmi špecifický a vysoko citlivý test in vitro. Princípom RIA je súťažná záväznosť. Tu rádioaktívny antigén súťaží s nerádioaktívnym antigénom o konštantné množstvo väzbových miest protilátky alebo receptora. RIA si vyžaduje špeciálne licencovanie a preventívne opatrenia, keďže sa používajú rádioaktívne látky, a patrí medzi najmenej nákladné techniky.
Obrázok 01: Imunoanalýza
Počas RIA sa známe množstvo antigénu často stáva rádioaktívnym tak, že sa označí gama-rádioaktívnymi izotopmi jódu naviazanými na tyrozín. Potom sa tento antigén spojí so známym množstvom protilátky. Tu sa antigén aj protilátka na seba špecificky viažu. Potom sa pridá vzorka krvného séra na spustenie kompetitívnej reakcie medzi značenými antigénmi a neznačenými antigénmi v sére so špecifickými protilátkami. Pri tejto reakcii protilátky uvoľňujú určité množstvo značeného antigénu. Toto množstvo je úmerné pomeru značeného a neznačeného antigénu. Nakoniec sa vytvorí väzbová krivka na odvodenie množstva antigénu v krvnom sére pacienta.
Čo je imunorádiometrická skúška?
Imunorádiometrická analýza (IRMA) je imunoanalýza, ktorá využíva rádioaktívne značené protilátky. V IRMA sú protilátky značené pomocou rádioizotopov. Tieto protilátky sa viažu na antigény prítomné v špecifickej vzorke. V pozitívnej vzorke sa protilátky, ktoré sú rádioaktívne značené, viažu na voľné epitopy antigénov. To vytvára komplex antigén-protilátka.
Počas druhej reakcie sa značené protilátky, ktoré nie sú naviazané, odstránia pomocou antigénu na pevnej fáze. Zvyšný počet rádioaktívnych protilátok v roztoku je priamou funkciou koncentrácie antigénu. IRMA je známy ako test s prebytkom činidla, kde sa ako činidlo používa nadmerné množstvo rádioaktívne značenej protilátky. Tu sa nechá reagovať nadmerná koncentrácia značenej protilátky alebo antigénu. Ako posledný krok sa oddelia protilátky naviazané na antigén a voľné protilátky a frakcia naviazaná na antigén sa podrobí rádioaktívnym testom. Tu je aktivita frakcie priamo úmerná koncentrácii antigénu.
Aké sú podobnosti medzi rádioimunotestom a imunorádiometrickým testom?
- Rádioimunoanalýza aj imunorádiometrická analýza sú imunoanalýzy, ktoré využívajú rádioaktívne prvky pri postupnej tvorbe komplexov antigén-protilátka.
- Tvoria komplex antigén-protilátka.
Aký je rozdiel medzi rádioimunotestom a imunorádiometrickým testom?
Rádioimunoanalýza je imunoanalýza, ktorá určuje hladiny protilátok pomocou antigénu značeného rádioizotopom, zatiaľ čo imunorádiometrická analýza je test s prebytkom činidla, ktorý využíva nadmernú koncentráciu rádioaktívne značenej protilátky. Toto je kľúčový rozdiel medzi rádioimunotestom a imunorádiometrickým testom. IRMA je schopná poskytnúť vyššiu citlivosť ako RIA. V RIA sú antigény značené gama-rádioaktívnymi izotopmi jódu, zatiaľ čo v IRMA protilátky sú značené pomocou izotopov jódu. Toto je tiež rozdiel medzi rádioimunotestom a imunorádiometrickým testom. Keďže IRMA je technika prebytočného činidla, test sa vykonáva v kratšom čase ako RIA.
Nasledujúca tabuľka sumarizuje rozdiely medzi rádioimunoanalýzou a imunorádiometrickou analýzou.
Zhrnutie – Rádioimunoanalýza vs imunorádiometrická skúška
Rádioimunoanalýza je imunoanalýza, ktorá využíva rádioaktívne prvky v postupnej tvorbe na stanovenie hladín protilátok. RIA zvyčajne používa rádioaktívne protilátky. Rádioaktívny antigén súťaží s nerádioaktívnym antigénom o konštantné množstvo väzbových miest protilátky alebo receptora. Imunorádiometrický test je imunotest vykonávaný na stanovenie hladín antigénu vo vzorke pomocou rádioaktívne značených protilátok. Tieto protilátky sa viažu na antigény prítomné v špecifickej vzorke. Na konci každého testu sa vytvorí komplex antigén-protilátka. Na získanie výsledkov testov sa nakreslí väzbová krivka. V rádioimunoteste je množstvo značeného antigénu úmerné pomeru značeného k neznačenému antigénu, ale v imunorádiometrickom teste je aktivita frakcie naviazanej na antigén priamo úmerná koncentrácii antigénu. Toto je súhrn rozdielu medzi rádioimunotestom a imunorádiometrickým testom.
