Kľúčový rozdiel medzi farbením Giemsa a farbením Leishman je v tom, že farbenie Giemsa je užitočné pri farbení oblastí DNA rôznych chromozómov na skúmanie rôznych aberácií, ako sú translokácie a preskupenia, zatiaľ čo farbenie podľa Leishmana je užitočné pri farbení a analýze krvného náteru na rozlíšenie a identifikáciu trypanozómov, leukocytov a parazitov malárie.
Sfarbenie je dôležitým krokom pri zvyšovaní kontrastu mikroskopického obrazu v kontexte mikroskopie, najmä na zvýraznenie rôznych štruktúr v biologických bunkách a tkanivách. Lazúra Giemsa a lazúra Leishman patria do skupiny lazúr Romanowsky, kam patrí aj lazúra Wright a lazúra Jenner. Bežne sú Romanowsky škvrny užitočné pri farbení krvných náterov. Používame to najmä pri štúdiu morfológie červených krviniek a pri vykonávaní diferenciálneho počtu bielych krviniek. Eozín Y a azúrové farbivá B sú bežnými zložkami lazúr Romanowsky. Postupy farbenia podľa Romanowského pomáhajú pri diagnostike rôznych chorobných stavov, ako je leukémia.
Čo je Giemsa Stain?
Giemsa farbenie zvyčajne pomáha rozlíšiť medzi cytoplazmatickou a jadrovou morfológiou krvných buniek, ako sú biele krvinky, červené krvinky a krvné doštičky. Pomáha tiež rozlišovať parazity. Používa sa najmä v cytogenetike a pri diagnostike malárie a iných parazitárnych ochorení. Okrem toho je farbenie Giemsa špecifické pre fosfátové skupiny, ktoré sú prítomné v DNA. Priľnú k oblastiam, kde je vo vlákne DNA vyšší počet väzieb adenín-tymín.
Obrázok 01: Giemsa Stain
Okrem toho je Giemsovo farbenie užitočné aj pri Giemsovom pruhovaní alebo G pruhoch na farbenie chromozómov a vytváranie karyogramov. Farbenie Giemsa má preto schopnosť identifikovať a vizualizovať rôzne abnormality v chromozómoch. Napríklad trofozoit Trichomonas vaginalis, ktorý vydáva zelenkastý výtok a pozostáva z pohyblivých buniek na vlhkých prípravkoch, je zafarbený Giemsovým farbivom. Ako bolo uvedené vyššie, škvrna Giemsa pôsobí ako typická škvrna na krvnom filme. Po zafarbení sa červené krvinky sfarbia do ružova, krvné doštičky sa zafarbia svetlo alebo svetloružovo a cytoplazma lymfocytov, monocytov a leukocytov sa zafarbí nebesky modrou, svetlomodrou a purpurovou farbou.
Giemsa lazúra je zmesou eozínu, metylénovej modrej a azúrovej B. Metylénová azúrová zmes, ktorá spolu s metylénovou modrou tvorí eozinát, túto zmes stabilizuje. V procese farbenia Giemsa sa na mikroskopické sklíčko najskôr umiestni tenký film vzorky. Ďalším krokom je fixácia čistým metanolom po dobu asi 30 sekúnd pridaním niekoľkých kvapiek metanolu na sklíčko. Potom sa podložné sklíčko ponorí do 5 % roztoku Giemsovho farbiva na približne 20-30 minút. Posledným krokom je umytie sklíčka vodou z vodovodu a vysušenie.
Čo je Leishman Stain?
Škótsky patológ William Boog Leishman je vývojárom Leishmanovej škvrny. Je to jedna z lazúr, ktorá patrí do skupiny lazúr Romanowsky. Okrem toho sa častejšie využíva pri diferenciácii a identifikácii rôznych malarických parazitov, trypanozómov – jednobunkových bičíkovitých prvokov, ktoré sú parazitické a leukocyty.
Obrázok 02: Leishman Stain
Základom Leishmanovho moridla je metanolová zmes, ktorá obsahuje zmes metylénovej modrej, ktorá je „polychrómovaná“; demetylované na rôzne typy azúrov a eozínu. Vzhľadom na stabilitu zásobného roztoku metanolovej zmesi ho môžeme použiť priamo do fixácie náteru, pričom odpadá prefixácia. Stabilita sa zníži, ak sa roztok zmieša s vodným pufrom. Pri vykonávaní diferenciálneho počítania buniek poskytuje Leishmanovo farbenie charakteristickú jasne fialovú farbu jadra a neutrofilným granulám. Zlepšuje teda diferenciáciu medzi jadrom a cytoplazmou. Tiež Leishmanova škvrna poskytuje kvalitnejšie kontrastné farbenie v porovnaní s inými škvrnami na báze metylénovej modrej a eozínu.
Vzhľadom na to, že na diferenciáciu a identifikáciu sa ostro riešia rôzne cytoplazmatické zložky, hematológovia uprednostňujú farbenie podľa Leishmana v porovnaní s inými farbeniami podľa Romanowskyho. Pri detekcii malarických parazitov sú postupy farbenia podľa Leishmana citlivejšie a presnejšie ako iné škvrny, ako napríklad Field's stain.
Aké sú podobnosti medzi Giemsa Stain a Leishman Stain?
- Giemsa škvrna a Leishmanova škvrna sú rozdielne škvrny.
- Obidve sú užitočné pri vykonávaní diferenciálneho počítania bielych krviniek a štúdiu morfológie buniek červených krviniek.
- Navyše, obe škvrny patria do skupiny Romanowsky morí.
Aký je rozdiel medzi Giemsa Stain a Leishman Stain?
Giemsa farbenie je užitočné pri farbení oblastí DNA rôznych chromozómov na skúmanie rôznych aberácií, ako sú translokácie a preskupenia, zatiaľ čo farbenie podľa Leishmana je užitočné pri farbení krvi na rozlíšenie a identifikáciu trypanozómov, leukocytov a parazitov malárie. Toto je kľúčový rozdiel medzi farbením Giemsa a farbením Leishman.
Bakterológ Gustav Giemsa navyše vyvinul techniku farbenia Giemsa, zatiaľ čo patológ William Boog Leishman vyvinul techniku farbenia podľa Leishmana. Ďalším významným rozdielom medzi lazúrou Giemsa a lazúrou Leishman je zloženie škvrny. Farbivo Giemsa je zmesou eozínu, metylénovej modrej a Azure B, zatiaľ čo farbivo Leishman je metanolová zmes, ktorá obsahuje zmes metylénovej modrej.
Zhrnutie – Giemsa Stain vs Leishman Stain
V kontexte mikroskopie zohrávajú techniky farbenia hlavnú úlohu pri zvyšovaní kontrastu mikroskopických obrazov rôznych biologických tkanív. Farbenie Giemsa je užitočné pri farbení oblastí DNA rôznych chromozómov na skúmanie rôznych aberácií, ako sú translokácie a preskupenia. Leishmanovo farbenie je užitočné pri farbení a analýze krvného náteru na rozlíšenie a identifikáciu trypanozómov, leukocytov a parazitov malárie. Takže toto je rozdiel medzi farbením Giemsa a farbením Leishmanom.
